PECAM1

引言当你在晨跑时是否能感受到双腿肌肉的律动，或是因情绪激动而面颊泛红？这背后都离不开一个精密系统的默默运作——血管网络。这个由动脉、静脉和毛细血管编织而成的三维管道系统，不仅承担着输送氧气和养分的重任，更是维持组织稳态的"隐形高速公路"。最新研究表明，人体血管的总长度可达10万公里，足以绕地球赤道两圈半。然而，这个庞大系统的构建过程却始终笼罩在神秘的面纱之下。4月17日发表在《Cell》杂志上的“Fate and state transitions during human blood vessel organoid development”揭示的成果，堪称血管发育研究的里程碑。研究团队运用单细胞多组学技术对hBVO发育过程进行了长达21天的动态追踪。当科学家利用小分子化合物组合诱导hBVO表达脑特异性转录因子LEF1时，电子显微镜下清晰可见类器官血管形成了类似血脑屏障的紧密连接结构。这种在体外重现器官特异性的突破，预示着未来或许能在培养皿中直接构建功能性的器官微环境。血管发育的基因蓝图：从干细胞到血管网络的时空交响曲在胚胎发育的第4天，一场关乎血管系统命运的关键抉择正在悄然上演。研究团队运用单细胞转录组测序技术，首次完整记录了人类血管类器官（hBVO）从多能干细胞到成熟血管网络的21天发育轨迹。数据显示，在分化第4天，约60%的中胚层祖细胞启动了内皮细胞（EC）分化程序，其标志性基因ETV2和KDR显著激活；而剩余40%的细胞则转向壁细胞（MC）谱系， ACTA2（平滑肌肌动蛋白）的表达量大幅增加。通过诱导型谱系追踪系统iTracer，科学家们首次捕捉到EC祖细胞（c14簇）的动态分化过程。这些细胞在分化初期同时表达内皮标志物NRP2和壁细胞标志物LUM，形成独特的过渡态群体。RNA速度分析显示，EC和MC的分化轨迹在第七天出现明显分叉，证实血管发育存在"非此即彼"的二元选择机制。基因调控网络的立体网络：16个核心调控因子的交响乐为了破译细胞命运决定的分子密码，研究团队开展了规模空前的CRISPR-Cas9全基因组筛选。通过构建包含数十个候选基因的干扰文库，结合单细胞转录组分析，最终锁定16个关键调控因子。这些因子构成三层调控网络：转录因子核心层：FLI1、MECOM、ERG组成EC命运决定的"铁三角"，其中MECOM缺失导致EC分化效率大幅下降；信号受体层：VEGFR2和NOTCH1形成血管发育的"阴阳双生系统"，VEGF-A浓度梯度通过调节DLL4/JAG1配体竞争决定动脉-静脉分化；表观调控层：染色质重塑复合体SWI/SNF通过动态调控染色质开放区域，控制PDGFRβ等壁细胞标志物的时空表达。尤为引人注目的是MECOM基因的双重角色：当其在EC祖细胞中过表达时，GJA5（动脉特异性连接蛋白）表达量提升；而在壁细胞中敲除MECOM，则导致IGFBP5（胰岛素样生长因子结合蛋白5）表达激增，这种双重调控机制为动脉粥样硬化治疗提供了全新靶点。时空密码的精准破译：染色质开放区域的动态交响单细胞ATAC-seq技术揭示了染色质开放区域的动态变化规律。在EC祖细胞（c14簇）中，位于GJA5启动子区的增强子区域在分化第6天出现显著的染色质开放信号，这与EC动脉化进程完美同步。有趣的是，移植到免疫缺陷小鼠体内的hBVO显示出独特的染色质重塑模式：原本处于关闭状态的静脉标志基因NR2F2（核受体亚家族2组F成员2）启动子区开放程度提升2.8倍，而动脉标志物CXCR4的染色质可及性下降40%，这种表观遗传的重编程完美模拟了胚胎发育中血流动力学对血管分型的调控作用。命运抉择的幕后推手：信号通路的阴阳博弈VEGF-Notch的黄金搭档：血管发育的动态平衡术通过药理学干预构建的"信号梯度板"实验，科学家们揭示了VEGF-A与Notch信号的精妙平衡机制。当VEGF-A浓度低于50 ng/ml时，EC增殖速率提升2.3倍；而浓度高于100 ng/ml时，则触发DLL4/Notch反馈环路，诱导动脉分化程序。移植实验进一步证实，体内微环境中的血流剪切力可通过激活Piezo1通道，将VEGF-A浓度梯度转化为动脉化的时空指令。Notch信号通路的调控更为复杂：当DLL4/JAG1配体竞争失衡时，血管网络会出现异常分支。通过CRISPR-Cas12a构建的NOTCH1敲除模型显示，EC的尖端细胞比例从正常状态的28%骤降至9%，而静脉标志物EphB4的表达量则上升3.5倍，这种双重表型印证了Notch信号在动脉-静脉分流中的"守门人"角色。MECOM的双面间谍角色：纤维化与分化的生死较量MECOM基因的发现堪称本研究最大的惊喜。在壁细胞分化过程中，MECOM通过招募HDAC3（组蛋白去乙酰化酶3）形成抑制复合体，沉默IGFBP5等纤维化相关基因的表达。当MECOM被CRISPR-Cas9特异性敲除后，IGFBP5的mRNA水平在24小时内飙升4.2倍，PDGFRβ+壁细胞中α-SMA（α平滑肌肌动蛋白）的表达量下降42%，这种表型与糖尿病患者血管壁增厚的病理特征高度吻合。更令人振奋的是，MECOM敲除的壁细胞在三维培养中展现出异常的收缩特性。原子力显微镜检测显示，这些细胞的杨氏模量降低37%，暗示其力学支撑功能受损。这种细胞表型的转变，为糖尿病血管并发症的机制研究提供了全新的视角。Wnt通路的阴阳两面：天使与魔鬼的平衡术Wnt信号通路的双刃剑效应在本研究中得到充分体现。低浓度CHIR99021（Wnt激活剂）处理使EC的周细胞覆盖率提升2.8倍，而高浓度处理则导致血管网络出现动静脉畸形。通过单细胞代谢组学分析发现，Wnt激活会诱导EC进入糖酵解主导的代谢状态，ROS（活性氧簇）水平上升2.3倍，这种代谢重编程可能是信号过载引发血管畸形的分子基础。疾病再现的微型舞台：血管类器官的疾病模拟革命糖尿病血管病变的镜像世界在模拟糖尿病微环境的实验中，hBVO展现出惊人的病理重构能力。当培养基中加入25 mM葡萄糖和TNF-α（20 ng/ml）时，EC的凋亡率在72小时内增加2.3倍，PDGFRβ+周细胞的覆盖率从正常的78%骤降至47%。更令人担忧的是，EC表面ICAM-1（细胞间粘附分子1）的表达量上升5.7倍，这种炎症反应与糖尿病患者视网膜血管渗漏的临床表型高度一致。通过空间代谢成像技术，科学家们发现病变区域的乳酸堆积量增加3.2倍，而谷胱甘肽水平下降45%。这种代谢紊乱导致EC线粒体嵴结构破坏，OXPHOS（氧化磷酸化）效率降低58%，为糖尿病血管病变的机制研究提供了直接的实验证据。先天性血管畸形的基因沙盘利用CRISPR-Cas12a构建的NOTCH3突变（R1231C，CADASIL致病位点）hBVO模型，首次在体外重现了该疾病的典型病理特征。突变EC的血管壁厚度减少42%，弹性纤维断裂指数上升3.5倍。透射电镜显示，平滑肌细胞的细胞器出现异常聚集，线粒体体积缩小至正常细胞的63%。更令人兴奋的是，这种基因编辑模型展现出对潜在治疗药物的快速响应。当加入γ-分泌酶抑制剂DAPT时，突变EC的NOTCH3胞内域（NICD3）表达量下降68%，血管壁厚度恢复至对照组的89%，这种快速的表型逆转为罕见病治疗提供了新的思路。肿瘤血管劫持的实时追踪在肿瘤条件培养基（含VEGF-A 300 pg/ml, IL-8 100 pg/ml）处理下，hBVO呈现出典型的"血管劫持"特征。EC表面整合素αvβ3的表达量在48小时内上升2.1倍，血管分支复杂性指数（BCI）从3.2降至1.7。有趣的是，肿瘤微环境诱导的EC表现出独特的代谢特征：谷氨酰胺摄取量增加4.5倍，而葡萄糖消耗量下降32%，这种代谢重编程为靶向肿瘤血管提供了新的生物标志物。器官特异的编程密码：从通用管道到功能特化的进化密码血脑屏障的体外重生通过LEF1过表达系统，科学家们在hBVO中首次实现了血脑屏障（BBB）的关键功能重建。转基因EC的紧密连接蛋白ZO-1表达量提升4倍，跨膜电阻值达到1500 Ω·cm²，这一数值已超过大多数现有体外模型的水平。冷冻电镜显示，相邻EC之间形成了连续的紧密连接带，孔径控制在8 Å以下，完美模拟了BBB的选择透过性。更令人振奋的是，这种工程化BBB能够有效阻止500 Da大分子的被动扩散，而对10 kDa脂溶性物质的转运效率提升2.8倍。当暴露于缺氧环境时，BBB模型表现出独特的适应性变化：GLUT1（葡萄糖转运蛋白1）表达量上升3.2倍，HIF-1α蛋白稳定性提高40%，这种动态调节能力为脑部疾病研究提供了前所未有的工具。肺微血管的精准定制在FGF10（200 ng/ml）和BMP4（50 ng/ml）的协同作用下，hBVO分化出气囊结构相关的毛细血管网。EC表面SP-C（肺表面活性蛋白C）的表达量上升2.8倍，PDGFRβ+周细胞覆盖率提升至91%。有趣的是，这些微血管表现出独特的力学特性：在周期性拉伸刺激下，血管壁的杨氏模量增加3.5倍，顺应性降低42%，完美模拟了肺泡呼吸运动的力学需求。心脏冠状动脉的形态发生通过构建脉冲式流体剪切力装置，科学家们成功诱导hBVO形成冠状动脉样结构。EC的排列方向趋同度达到92%，PDGFRβ+壁细胞定向包绕形成螺旋状血管束，血管直径从中央的150 μm渐变至末端的80 μm。单细胞测序显示，这些血管的EC高表达CXCL12（基质细胞衍生因子1），而壁细胞富集ANPEP（氨基肽酶N），这种基因表达模式与胚胎期冠状动脉发育高度相似。未来医学的种子库：类器官驱动的精准医疗革命患者特异性疾病建模：精准医学的基石在糖尿病患者的iPSC来源hBVO中，EC的线粒体DNA拷贝数减少47%，OXPHOS复合体I活性下降58%。更重要的是，这些模型对二甲双胍的治疗响应与临床观察完全一致：EC凋亡率在用药后72小时下降62%，PGC-1α（过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α）表达量回升至正常水平的79%。这种高度一致的表型，为个体化药物筛选提供了"活体实验室"。药物毒性预测新范式：超越传统的2D模型利用hBVO进行的化疗药物毒性测试显示，长春新碱的EC毒性阈值比传统模型低3.7倍，预警时间提前72小时。更值得注意的是，hBVO能区分同类药物的不同构型毒性：紫杉醇白蛋白纳米粒的EC损伤指数比普通制剂低56%，这种差异在传统模型中完全无法检测。再生医学的终极梦想：预建血管模板的移植实验在免疫缺陷小鼠的肾包膜下移植实验中，hBVO在12周内形成了包含动脉、静脉和毛细血管的三级网络。荧光示踪显示，移植血管与宿主循环建立了功能性连接，EC表面PECAM-1（血小板内皮细胞粘附分子1）的表达量维持在正常水平的83%。组织学分析证实，移植血管的基底膜厚度（35 nm）与宿主血管无统计学差异，这种高度兼容性为器官再生提供了新的治疗策略。站在生命科学的十字路口当我们在显微镜下观察这些跳动着的微小心血管网络时，仿佛看到了生命最原始的蓝图正在重新书写。从单细胞分辨率的基因调控网络，到毫米级功能结构的器官再造，hBVO研究正在改写我们对血管发育的认知边界。这些在培养皿中演绎的生命奇迹，不仅为疾病治疗开辟了新天地，更让我们重新思考生命的本质——原来，那些看似复杂的生理过程，都暗藏在数十亿年的进化密码之中。这项研究首次解码了血管发育的基因蓝图，其价值不仅在于揭示发育机制，更在于为疾病治疗开辟了前所未有的精准路径。当这些微型血管网络开始"诉说"人体的奥秘时，我们离"按需制造器官"的未来已不再遥远。这场始于单细胞的科学革命，终将在临床转化的舞台上绽放璀璨光芒。参考文献Nikolova, M. T., He, Z., Seimiya, M., Jonsson, G., Cao, W., Okuda, R., Wimmer, R. A., Okamoto, R., Penninger, J. M., Camp, J. G., & Treutlein, B. (2025). Fate and state transitions during human blood vessel organoid development. Cell, 188(12), 1 - 20.责编|探索君排版|探索君转载请注明来源于【生物探索】声明：本文仅用于分享，不代表平台立场，如涉及版权等问题，请尽快联系我们，我们第一时间更正，谢谢！End往期精选围观Nature | 靶向线粒体VDAC2：破解实体瘤免疫治疗抵抗的"死亡密钥"热文Nature Medicine | 多囊女性子宫内膜藏着什么秘密？——全球首份单细胞图谱揭示治疗新方向热文Nature | 颠覆认知！大脑学习的惊人秘密：你的“潜伏知识”是如何瞬间爆发的？热文Cell | 颠覆认知！染色体形成并非依赖“骨架”，自组织模型重塑教科书热文Science | 为什么我们回想不起三岁前的经历?

点击蓝字｜关注我们P-selectin在多种实体瘤的肿瘤血管内皮细胞中高表达，包括淋巴瘤、卵巢癌、乳腺癌、肺癌等。这种高表达与肿瘤的炎症微环境有关，可能与肿瘤的进展和转移相关。P-selectin可以通过与肿瘤细胞表面的糖基化配体相互作用，促进肿瘤细胞的滚动和黏附，从而有助于肿瘤细胞的转移。血液中可溶性P-selectin水平的升高与多种癌症患者的不良预后相关，提示P-selectin可能作为肿瘤进展的一个生物标志物。P-selectin是一种C型凝集素家族的黏附分子，由一个细胞外的凝集素结构域、一个表皮生长因子（EGF）样结构域、一个补体调节蛋白（CCP）结构域和一个跨膜结构域组成。鉴于上述特性，研究者利用P-selectin作为synNotch（合成Notch）受体的激活配体。当CAR T细胞进入肿瘤微环境时，P-selectin与synNotch受体结合，触发CAR的表达，从而使CAR T细胞获得对肿瘤细胞的特异性杀伤能力。该研究近日发表在Science Advances，标题为“Microenvironment actuated CAR T cells improve solid tumor efficacy without toxicity”高亲和力GD2 CAR-T细胞在免疫缺陷小鼠脑内引起显著的T细胞浸润，主要为CD8+ T细胞，导致快速体重下降、抓力减弱和神经毒性行为（如转圈、后肢瘫痪），最终导致小鼠死亡，这暗示GD2靶点存在严重的脱靶风险。研究人员发现P-selectin在神经母细胞瘤的肿瘤血管内皮细胞（CD31+）中高表达，而在正常外周神经和脑组织中表达极低，表明其作为肿瘤特异性激活配体的潜力。CAR的分子设计如下图所示，其中使用FDA批准的抗P-selectin抗体（crizanlizumab）的scFv片段构建了P-selectin特异性的synNotch受体。MEAT (MicroEnvironment Actuated T)细胞在体外实验中表现出对P-selectin的特异性响应，仅在与P-selectin结合后才表达CAR，并且能够特异性地杀死表达GD2的肿瘤细胞。此外MEAT细胞在P-selectin存在时表现出延迟的CAR激活和细胞毒性，与传统CAR T细胞相比，显示出更高的特异性和安全性。有趣的是，这种逻辑门控设计为CAR-T细胞提供了“休息"的机会，这在应对慢性刺激模型时展现出很好的持续战斗特性，这种间歇性”休息“也可以参考阅读之前的几篇推文”为了探索T细胞是否可以永生，科学家把T细胞一直传代了10年“以及”T细胞的分裂充满生存智慧“。代谢分析显示，MEAT细胞在静息状态下具有更高的线粒体功能和代谢适应性，这有助于其在体内的持久性和抗肿瘤活性。最终，研究者构建了表达P-selectin的神经母细胞瘤小鼠模型，评估MEAT细胞的抗肿瘤效果和特异性。结果显示在P-selectin阳性的肿瘤模型中，αP-selectin synNotch GD2 CAR T细胞显著延迟了肿瘤生长，且未引起脑内T细胞浸润或神经毒性。在P-selectin阴性的肿瘤模型中，MEAT细胞未显示出抗肿瘤效果，表明其激活依赖于P-selectin的存在。虽然从整体来看抗肿瘤效果弱于传统的GD2 CAR-T细胞，但是安全性的提高也带来了治疗窗口的增加，各有利弊。同样，在CD19靶点模型中也观察到了该门控CAR-T优异的持续性和抗肿瘤活性，暗示了这一设计思路的进一步开发潜力。参考文献DOI: 10.1126/sciadv.ads3403推文用于传递知识，如因版权等有疑问，请于本文刊发30日内联系医药速览。原创内容未经授权，禁止转载至其他平台。有问题可发邮件至yong_wang@pku.edu.cn获取更多信息。©2021 医药速览 保留所有权利往期链接“小小疫苗”养成记 | 医药公司管线盘点 人人学懂免疫学| 人人学懂免疫学（语音版）   综述文章解读 | 文献略读 | 医学科普|医药前沿笔记PROTAC技术| 抗体药物| 抗体药物偶联-ADC核酸疫苗 | CAR技术| 化学生物学温馨提示医药速览公众号目前已经有近12个交流群（好学，有趣且奔波于医药圈人才聚集于此）。进群加作者微信（yiyaoxueshu666）或者扫描公众号二维码添加作者，备注“姓名/昵称-企业/高校-具体研究领域/专业”，此群仅为科研交流群，非诚勿扰。简单操作即可星标⭐️医药速览，第一时间收到我们的推送①点击标题下方“医药速览”  ②至右上角“...”  ③点击“设为星标

14岁的初中生小浩（化名）半年前开始右大腿隐隐作痛，夜间尤其难熬，像是“骨头缝里插了根烧红的铁钉”。父母安慰他：“男孩子长个子都这样，多喝牛奶补钙。”校医也诊断为“生长痛”，开了钙片和止痛药。可疼痛非但没缓解，小浩还开始低烧，体温总在37.5℃-38℃之间徘徊，稍微运动就大汗淋漓。妈妈心疼：“这孩子免疫力太差，得炖点黄芪鸡汤补补。” 直到一次体育课跳远，小浩右腿突然“咔嚓”一声脆响，剧痛让他蜷缩在地。急诊X光片显示右股骨中段溶骨性破坏，内部布满“蜂窝状”空洞，周围骨膜如“洋葱皮”层层掀起。MRI更触目惊心——肿瘤组织如“灰白色岩浆”从骨髓腔喷涌而出，吞噬了周围肌肉。 术中刮开股骨时，医生发现骨髓腔已被暗红色“腐肉”填满，血液像漏水的管道般不断渗出。病理报告显示弥漫分布的小圆细胞，免疫组化CD99膜阳性，基因检测EWSR1-FLI1融合阳性，确诊为尤文肉瘤(Ewing肉瘤，ES)。 临床表现及分型 ES可分为“远端型”和“近端型”。远端型通常发生在四肢末端，常见于青少年，肿块质硬，可能伴随溃疡。近端型则发生在头颈、躯干等接近中线的部位，多见于中老年人，且更易侵犯深层组织如肌腱和筋膜。 虽然局部生长较慢，但Ewing肉瘤具有较高的转移性，特别是近端型。最常见的转移部位为肺，肺转移的影像学表现多样，可能被误诊。即使初诊为M0（无转移），治疗后5年内仍有高达33%的转移发生率。因此，早期诊断和定期随访非常重要。 诊断 Ewing肉瘤（ES）诊断依赖于病理检查。低倍镜下，肿瘤呈结节状生长，中央有坏死、出血和囊性变。高倍镜下可见嗜酸性上皮样细胞和梭形细胞。嗜酸性上皮样细胞异型性明显，梭形细胞呈涡纹状排列。 免疫组化是区分ES与其他肿瘤（如血管肉瘤、恶性横纹肌样瘤）的关键。ES通常同时表达上皮和间叶标记（如CK、Vimentin），不表达CD68、CD31等。INI阴性是诊断ES的证据，ERG和SALL4联合检测可帮助区分ES和恶性横纹肌样瘤。 此外，CA125标记物在ES中有一定诊断价值，升高与疾病进展相关，监测其水平有助于评估治疗效果和随访观察。 治疗 Ewing肉瘤（ES）的治疗主要包括手术、化疗和分子靶向治疗。 手术治疗：局限期ES首选手术切除，手术方式根据肿瘤的大小、部位和患者的意愿选择。截肢虽能提高治愈率，但不能完全避免复发或转移。孤立性肢体灌流结合化疗和皮瓣重建为替代方案。 化疗：转移性ES主要通过化疗治疗。常用药物包括表阿霉素、多柔比星与异环磷酰胺联合治疗。吉西他滨联合多西他赛效果更佳，术后辅助化疗是否能降低复发仍有争议。 分子靶向治疗：靶向治疗逐渐受到关注，主要针对PI3K/AKT/mTOR和c-MET信号通路，抑制药物（如依维莫司、INC280）可抑制ES细胞生长。组蛋白去乙酰化酶抑制药（如SAHA、FK228）在实验中显示抑制肿瘤效果，但临床应用仍有限。 参考资料： [1]何建,周向东.上皮样肉瘤研究进展[J].武警医学,2017,28(12):1286-1288.DOI:10.14010/j.cnki.wjyx.2017.12.032. [2]王晶晶，许春伟,张俊,等.上皮样肉瘤临床病理特征并文献复习[J].临床与病理杂志,2015,35(3):523-528. [3]李莉，夏秋媛，饶秋，等.上皮样肉瘤免疫表型和INI1基因改变的研究[J].中华病理学杂志，2014,43（6)：389-393. 来源 | 梅斯医学 编辑 | wanny 神经系统罕见病交流群 ↓点击下方“阅读原文”，下载梅斯医学APP吧！