CALM2

湖州德清 2024年12月24日 /美通社/ -- 日前，由中国抗癌协会乳腺癌专业委员会（CACA-CBCS）和中华医学会肿瘤学分会乳腺肿瘤学组主导编撰的《乳腺癌诊治指南与规范（2025年版精要本）》在上海正式发布，新增了多基因检测工具妈妈泰谱 ® （MammaTyper ® ），以更好地满足临床对于激素受体（ER/PR）阳性且HER2阴性的早期乳腺癌患者精准预后和指导辅助化疗决策方面的需求。 对于早期 Luminal 型乳腺癌，通过多基因评估结合临床病理因素，可以有效帮助临床评估长期预后并辅助化疗决策。目前国际指南推荐的预后工具包括Oncotype DX ® (原研21基因)、MammaPrint ® (70基因)、EndoPredict ® (12 基因)等。然而，在国内市场上，多基因检测工具面临着两大挑战：一、市场上存在仿制或自制产品，原研21基因国内并不可及，国内市场上的仿制品未获得NMPA批准，且缺乏研究证明其与原研产品的一致性，因此其检测结果准确性有待进一步验证；二、原研产品在国内不可及或价格较高，这大大限制了原研产品的可及性，无法在庞大的患者群体中普及。 妈妈泰谱 ® （MammaTyper ® ）是目前已有研究证明可以预测原研21基因低危人群的多基因检测产品，该研究发布于2018年SABCS会议，研究共入组306例（训练组202例、验证组104例）早期浸润性乳腺癌患者，IHC检测均为ER阳性、HER2阴性，并均有Oncotype Dx ® （原研21基因）RS评分结果，以RS评分≤25定义为低危人群，进行MammaTyper® LRP评分模型训练和验证。研究显示，在验证组中，LRP评分对于RS评分≤25的阳性预测值（PPV）达到100%，可以实现原研21基因低危人群初筛。 妈妈泰谱 ® （MammaTyper ® ）不仅在预后能力上表现出色，其准确的分型能力同样值得关注。作为国内首个经NMPA批准上市的乳腺癌分子分型产品，注册临床研究表明，妈妈泰谱®（MammaTyper ® ）的检测结果与国内顶级病理科三位资深病理医生阅片阴阳性一致的结果相媲美，四个标志物的一致性均达90%以上。 随着乳腺癌精准诊疗需求的提升，基于ER/PR/HER2/Ki-67四个标志物的IHC分子分型显示出一定的局限性。对于ER/PR弱阳、HER2低表达、Ki-67 5%-30%等IHC较难判定的灰区患者，IHC检测的一致性较差，可能会导致患者过度治疗或治疗不足。妈妈泰谱 ® （MammaTyper ® ）通过定量PCR方法检测上述指标的mRNA表达水平，能提供准确的、客观的、可重复的结果，辅助临床精准分型及指导后续治疗方案。 而对于IHC争议最大的标志物Ki-67，妈妈泰谱 ® （MammaTyper ® ）在两项国外的临床研究中，均展现出稳定且准确的检测性能。FinHER研究共纳入719例回顾性样本，进行MammaTyper ® 检测分型，并对比分析MammaTyper ® 和IHC检测的分型和预后价值。对于IHC检测ER阳性的患者，MammaTyper ® 和IHC检测MKI67/Ki-67结果不一致时（N=143），患者预后更符合MammaTyper ® 检测结果（5年DDFS：97%（MKI67阴性）vs. 86%（MKI67阳性））。在PATH研究中也观察到类似结果，该研究入组322例IHC/ISH检测为ER阳性、HER2阴性早期乳腺癌患者，仅进行辅助内分泌治疗，中位随访7.8年，研究结果发现基于MammaTyper ® 检测，对于ESR1阳性、ERBB2阴性的患者，MKI67阴性和阳性的患者具有显著的预后差异（N=314, HR=2.77, p=0.0077）。两项研究均证明了MammaTyper ® 检测的MKI-67与患者预后有明确的相关性，更加符合实际临床预期，可以辅助临床对患者进行精准的分子分型以及预后评估。 总结： 妈妈泰谱 ® （MammaTyper ® ）以其NMPA获批、精准的分型能力、原研21基因的头对头对比研究以及相对亲民的价格，充分体现了其合规性、准确性和普适性。作为首个国内获批上市的乳腺癌分子分型的mRNA多基因表达PCR产品，其获批标志着乳腺癌分子分型从传统的病理人工阅片正逐步走向以PCR技术为代表的分子检测模式。 关于妈妈泰谱 ® ： 妈妈泰谱 ® （MammaTyper ® ）是数问生物和德国BioNTech公司独家合作、共同研发的产品，由数问生物拥有全球范围内的全部知识产权，通过qPCR方法检测四个目标基因ESR1/ER、PGR/PR、ERBB2/HER2、MKI67/Ki-67以及两个内参基因B2M、CALM2的基因表达水平，无需病理人工阅片，避免了人为主观因素，具有高度的可重复性，保证检测结果的客观性和可靠性，以进一步辅助判断乳腺癌分子分型，从而推动乳腺癌精准化、个体化诊疗。 诚邀共赢： 招募全国范围合作伙伴！ 欢迎具有病理科、乳腺癌科长期合作资源、具有成熟的业务团队或个人加入，与数问一起开创乳腺病理精准诊疗新时代。 合作洽谈请联系 招商经理：张经理 联系电话：13735519816(同微信) 公众号：精准诊断 与汝同行

阿尔茨海默病（AD）是一种多见于老年人的神经系统退行性疾病。正如影视作品中所描述的这样，随着疾病的进展，患者逐渐忘记周围的人，忘记自己引以为傲的过去，失去丰沛的感情，最终丧失生活能力。 阿尔茨海默病（AD）是一种多见于老年人的神经系统退行性疾病。正如影视作品中所描述的这样，随着疾病的进展，患者逐渐忘记周围的人，忘记自己引以为傲的过去，失去丰沛的感情，最终丧失生活能力。 而有这样一类人群：APOE4基因的携带者，他们患AD的风险更高，发病也更早 [1]。 长期以来，人们对APOE4基因做了大量研究，尝试揭开APOE4推动AD发生发展的秘密。但既往研究大都局限于某一种细胞或者某一条通路，让我们无法对APOE4与AD病理进程的关系建立完整的概念。 近期，来自美国加利福尼亚大学的黄亚东教授团队的一项研究，通过记录小鼠大脑内单细胞核转录组学变化，发现敲除神经元内APOE4基因可改善Tau蛋白介导的胶质细胞激活，神经系统脱髓鞘改变和神经元死亡等一系列病理损伤[2]。研究成果发表在《自然•衰老》上。 文章首页截图 APOE有三种等位基因，其中APOE4可以大大提高患AD的风险，而APOE2正相反，可以降低AD的发病风险。APOE3被称为野生型，对AD风险增加或减少无明显作用[3]。 为了研究APOE4的作用，研究者们将表达loxP序列的人APOE3和APOE4基因的小鼠，与神经元特异性启动子Syn1-Cre小鼠杂交，得到了可以在神经元内特异性敲除APOE基因的小鼠。 在此基础上，研究者们将上述模型鼠与Tau蛋白病理模型鼠PS19杂交，得到了四种转基因小鼠模型：PS19-fE3，PS19-fE3/Syn1-Cre，PS19-fE4，PS19-fE4/Syn1-Cre。这样就可以在神经元内存在或不存在APOE基因的情况下观察Tau蛋白病理变化。 接下来，研究者们在小鼠10月龄时对海马中Tau蛋白病理进行了检测，实验结果表明，表达APOE4的小鼠海马区域有大量的磷酸化Tau蛋白和神经元纤维缠结。在神经元内特异性敲除APOE4后，磷酸化Tau蛋白的水平下降了81%，含有纤维缠结的神经元数量也明显降低了（P=0.0103）。 通过在小鼠右侧海马注射表达P301S突变Tau蛋白的慢病毒载体，研究者们观察到表达APOE4的小鼠左侧海马Tau蛋白病理阳性的神经元数量增加，在神经元内敲除APOE4后有明显改善（P<0.0001）。说明APOE4在Tau蛋白异常磷酸化，Tau蛋白聚集，和Tau蛋白在神经元间传播过程中全部发挥了作用。 图a，b: PS19-fE4小鼠中磷酸化Tau和神经纤维缠结较PS19-fE3小鼠明显增加，在神经元中敲除APOE4后下降。图c，d：在右侧海马注射P301S Tau表达载体后，fE4小鼠左侧海马人源性Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白均高于敲除组。图e.f：APOE4存在时海马中不可溶性磷酸化Tau蛋白增加。 Tau蛋白病理与AD的进展密切相关，那么，如果在神经元内特异性敲除APOE4是否能改变这一进程呢？ 研究者们对此一一进行了解答。首先，研究发现PS19-fE4小鼠海马区发生了神经退行性改变,这一组小鼠的海马体积显著缩小，海马CA1区和齿状回的厚度明显变薄，神经元凋亡标志物Caspase-3剪切体表达明显升高（P<0.0001），这说明神经元出现了严重的死亡情况。 而PS19-fE3，PS19-fE3/Syn1-Cre和PS19-fE4/Syn1-Cre三组小鼠均未出现明显的神经元死亡情况，说明上述神经退行性改变是由于APOE4存在引起的。 图a，b: PS19-fE4小鼠海马体积减小，齿状回厚度降低，敲除神经元APOE4后恢复。图c，d：PS19-fE4小鼠海马出现神经脱髓鞘改变和神经元过度兴奋，敲除神经元APOE4后恢复。 在髓鞘损伤的检测中也有类似的发现。 研究人员检测了PS19-fE4小鼠海马区髓鞘损伤情况和髓鞘修复情况。结果发现APOE4存在的情况下小鼠髓鞘受损严重。在海马区特异性敲除APOE4后，髓鞘受损情况和损伤修复情况均恢复到了与PS19-fE3小鼠相似的水平。 除此之外，研究者们还发现与PS19-fE3小鼠相比，PS19-fE4小鼠CA1-CA3环路过度兴奋，小胶质细胞和星形胶质细胞明显激活。APOE4敲除后这两种现象都得到了缓解。 由此可见，神经元内APOE4的敲除减缓了Tau蛋白病理状态下的神经元死亡、神经系统脱髓鞘改变和神经元功能的改变。 通过上述结果，我们不难发现，神经元内APOE4的存在不仅影响了神经元本身，还影响了胶质细胞。那么在整个海马区域，是不是所有细胞都受到了这种影响，共同推动了神经退行性改变的进展呢？ 接下来的实验中，研究者们对PS19-fE3，PS19-fE4，PS19-fE4/Syn1-Cre三组小鼠海马区的细胞进行了单细胞核转录组分析，根据不同的细胞标记基因表达水平变化，将整个海马区的细胞分成了34个类群。 根据每群细胞在三组小鼠中数量占比的不同，研究者们将在PS19-fE4小鼠中显著增加的细胞群定义为神经元APOE4介导的疾病相关(nE4-DA)细胞群。 图a: 单细胞核转录组分析将海马细胞分为34个亚群。图b: 三组小鼠中不同亚群细胞中APOE表达情况。图c：疾病相关神经元中高表达和低表达的基因。图d：PS19-fE4/Syn1-Cre小鼠与PS19-fE4小鼠相比疾病相关神经元中基因表达的变化情况。 在对这些特殊细胞群进行基因表达分析时，研究人员有了令人兴奋的发现。 不论什么种类的细胞中，nE4-DA细胞群均高表达Hspa8，Hsp90aa1，Hsp90ab1，Calm1，Calm2，Nrgn和Ubb这几种基因。 不仅如此，通过对PS19-fE4/Syn1-Cre小鼠的nE4-DA细胞群进行分析，研究者们发现清除神经元中的APOE4基因后，上述基因表达量降低了。这说明APOE4的清除不仅改变了nE4-DA细胞群的数量，还改变了nE4-DA细胞群的基因表达。这些在APOE4存在情况下高表达的基因，可能就是解开APOE4致病机制之谜的关键。 总的来说，本研究重点关注了神经元中APOE4对Tau蛋白病理的推动作用，发现神经元中特异性敲除APOE4可以使海马中的病理性Tau蛋白含量下降81%。尽管神经元中的APOE4如何介导其它细胞的病理变化还有待探索，但本文已经为我们提供了很有利的证据。如果能够找到安全稳定的方法特异性敲除神经元中的APOE4基因，也许能够降低这类人群的患病风险。 参考文献： [1] Corder EH, Saunders AM, Strittmatter WJ, et al. Gene dose of apolipoprotein E type 4 allele and the risk of Alzheimer's disease in late onset families. Science. 1993;261(5123):921-923. doi:10.1126/science.8346443 [2] Koutsodendris, N., Blumenfeld, J., Agrawal, A. et al. Neuronal APOE4 removal protects against tau-mediated gliosis, neurodegeneration and myelin deficits. Nat Aging (2023). https://doi.org/10.1038/s43587-023-00368-3 [3] Shi Y, Yamada K, Liddelow SA, et al. ApoE4 markedly exacerbates tau-mediated neurodegeneration in a mouse model of tauopathy. Nature. 2017;549(7673):523-527. doi:10.1038/nature24016

遇到极小概率事件是中头彩吗？澳大利亚的Kathleen Folbigg绝不会这么认为。 遇到极小概率事件是中头彩吗？澳大利亚的Kathleen Folbigg绝不会这么认为。 她有可能是有史以来全球最不幸的女性之一：她18个月大时，父亲因杀死母亲而服刑，之后在孤儿院长大；婚育的4个孩子全部夭折，被丈夫指控系自己谋杀或误杀，舆论认定她为连环杀子恶魔；36岁时入狱，最终被判30年监禁。 然而，Folbigg坚称自己蒙冤，4个孩子均为自然死亡。 Folbigg入狱19年后的今天，此案有了转机。11月14日，澳洲法庭召开新的调查听证会，来自全球各地的科学家和临床医生倾向于认为，4个孩子的夭折或许是基因变异作祟。 如果证据进一步得到认可，已经55岁的Folbigg可能会沉冤昭雪，一洗“连环杀子”恶名，从而重获自由。 被冠以“连环杀子”恶名的Folbigg今年已经55岁。图源：澳大利亚科学院相关视频截图 至少在外人看来，Folbigg的人生自出生起就一路下滑，只有大大小小的波谷，而没有波峰。 1989年2月20日，大儿子Caleb出生仅19天即夭折，医生给出的结论是婴儿猝死综合征（SIDS）。 这种病俗称为婴儿床死亡。因为婴儿往往死在婴儿床上，但病因不明。该病常常发生在午夜，不会发出声音，也不会有挣扎迹象，没有证人，尸检也难以给出结论。更早之前，科学家把婴儿猝死综合征的诱发因素归于婴儿的睡姿和父母的抽烟。 1991年2月18日，二儿子Patrick在出生8个多月后死于癫痫，而之前他还曾被诊断出皮质盲，即瞳孔反射正常的视觉缺损。 1993年8月29日，大女儿Sarah也只活了10个多月即死亡，医生结论同为婴儿猝死综合征。 1999年2月27日，二女儿Laura在出生18个月后离世，她有心肌炎。 Folbigg的4个子女    图源：澳大利亚科学院相关视频截图 4个子女的接连夭亡，让她的丈夫Craig Folbigg产生了怀疑，直到他发现了Folbigg的日记本。1997年11月，也就是二女儿出生后的两个月，Folbigg认为自己应对二女儿的哭闹更从容一些，她写道，“和大女儿在一起，我只想让她闭嘴。有一天她消停了。”另一篇日记中如此记述：“我知道自己有时对她脾气暴躁和残忍，她终于离去了。” Folbigg日记中的一段文字 这本日记，成为了指控她的证据之一。负责该案的法官认为，Folbigg的这些记述等于间接承认了谋杀自己的儿女。 更说服法官的证据来自英国儿科医生Roy Meadow，他在早期被世人认为是英国最杰出的儿科医生和儿童虐待问题的权威专家。他有句格言颇有市场，即“一个婴儿猝死是悲剧，两个是可疑的，三个则是谋杀，除非有相反证据。”因为此类死亡极其罕见，难以用自然原因解释。 检察官认同了这样的观点：闪电不会击中同一个人4次。 这样的判决是有先例的。在另一个类似的英国案件中，当事人Sally Clark被指控谋杀了自己的两个儿子。Meadow给出的数据和理论就成了判决依据，他提出单次婴儿猝死概率为8500分之一，而两次这样的死亡概率是这一数字的平方，约为7300万分之一。 然而，检方犯了一个错误：概率并不等于因果。即使是微乎其微的概率事件，何况双重亲子谋杀是现实中一样极其罕见的。这个逻辑在Folbigg案中同样适用。 此外，Meadow的数据推导被业内统计专家指责有误导。因为同一个家庭中发生第二例类似情况的概率会陡升，而不是相互独立。如果是基因出了问题的家庭，就很可能出现第二例。 在1999年被定罪后，Clark选择上诉，最终于2003年1月无罪获释。 Meadow也因为在Clark案中提供了错误证据，而被英国医学总会（GMC）除名。尽管在2006年他上诉后恢复资格，但法院仍然裁定他已经构成不当行为。 Folbigg也一直坚称自己清白。但与Clark一直有丈夫支持不同，Folbigg的丈夫站在了她的对立面。 好运并没有在2003年撞上Folbigg。 英国的Clark重获自由4个月后，澳洲的Folbigg却被判犯有3项谋杀罪、1项过失杀人罪和1项蓄意严重身体伤害罪，最终裁决是执行30年监禁。需要强调的是，尸检并未发现4个孩子有窒息迹象。 在狱中煎熬16年后，Folbigg的转机在2019年出现了。 她的律师联系到了澳大利亚国立大学著名免疫学家Carola Vinuesa，后者对夭折婴儿的冷冻细胞样本进行了全基因组测序。结果发现一个此前从未报道过的基因变异：两个女儿均携带了一种可能导致心源性猝死的CALM2基因变异。而且，这个变异在Folbigg的基因组中同样存在。不过，Folbigg的丈夫拒绝提供样本来测序。 2020年11月，丹麦奥尔堡大学教授Michael Toft Overgaard领导的一个国际团队有了新发现。他们在欧洲心脏病学学会官方期刊EP Europace上发表论文指出，上述基因变异会导致婴儿的心率失常，使其患有心脏病。尤其是考虑大女儿Sarah因咳嗽服用了抗生素，而二女儿Laura因呼吸道感染在服用扑热息痛和伪麻黄碱，这种嫌疑就更为增加。伪麻黄碱会促进内源性儿茶酚胺的释放，后者则会诱发一种致命的心动过速。 至此，论文给出结论，这种变异很可能导致了两名女婴的自然死亡。 2004 年，狱中的Folbigg。  图源：澳大利亚科学院相关视频截图 还有一些辅助证据，比如在2019年5月，类似基因CALM3的突变导致了美国一个家庭5岁的姐姐死于心律失常，4岁弟弟也发生了心脏骤停。 EP Europace论文发表数月后，2021年3月2日，包括遗传学家、儿科专家和心脏病学家在内的超过90位知名专业人士联署签名发信，呼吁基于已有科学证据来考虑赦免Folbigg。其中包括2009年诺贝尔生理学或医学奖得主Elizabeth Blackburn和1996年诺贝尔生理学或医学奖得主Peter Doherty。 科学家的呼吁也得到了法律专家的关注。《自然》杂志引述法律学者Emma Cunliffe的看法称，如果调查发现儿童的基因变异“可能致病”或“致病”，就可以对Folbigg的定罪提出足够合理的怀疑。 尽管有科学的初步证据和诺奖得主声援，都没有将Folbigg的4个孩子夭折的原因一锤定音。一些疑问尚待解决，比如两个儿子的死因还没有遗传学的明确指向。再比如Folbigg携带了CALM2基因变异，为何她自己的健康未受影响。值得注意的是，在医学研究史上确有不少论文声称发现了危险的基因变异，然而最终证明无害。 11月14日，澳洲法院为了审查科学家提供的新证据，决定将对Folbigg的司法调查延期至2023年2月。届时，心理学家也将会给出Folbigg日记的最新分析，因为有专家对这些日记有了不同的解释。 Folbigg洗脱罪名的时刻会来临吗？世人在翘首以待。