AB-011

靶向癌症中的紧密连接蛋白Claudin 原文标题：Targeting claudins in cancer 发表期刊：Nat Rev Drug Discov, IF-91.2(1区)；DOI: 10.1038/s41573-026-01450-2 关键信息： 1. 紧密连接蛋白Claudin家族包含27个成员，是上皮屏障和极性的核心调节者，其表达在多种癌症中发生异常 2. 靶向Claudin的治疗策略已取得里程碑式进展，其中CLDN-18.2靶向单抗佐妥昔单抗于2024年获得美国FDA批准用于治疗胃癌，标志着该类靶点从实验室走向临床的成功 3. 目前，针对CLDN-18.2、CLDN-6、CLDN-4和CLDN-1的多种治疗模式(包括单抗、抗体药物偶联物、双特异性抗体、CAR-T细胞和RNA药物)正处于不同阶段的临床开发中，展现出广阔的应用前景 4. 然而，Claudin在正常组织中的广泛表达带来了安全性挑战，尤其是胃肠道毒性；同时，开发高特异性结合剂、建立可靠的临床前安全评估平台以及探索非抗体类靶向模式，仍是当前面临的主要瓶颈 5. 成功的关键在于深入理解Claudin的生物学特性、开发更精准的伴随诊断以及创新的药物设计。靶向这类非传统致癌驱动因子的成功，不仅为特定肿瘤亚型(如CLDN-18.2阳性胃癌和胰腺癌)提供了新的治疗选择，也革新了肿瘤治疗靶点的概念，未来有望将治疗策略拓展至更广泛的实体瘤类型 引言与背景：紧密连接与Claudin蛋白家族的发现 上皮源性恶性肿瘤占人类肿瘤的大多数，这类肿瘤因其高度的异质性、强大的转移潜能和治疗抵抗性，给临床治疗带来了巨大挑战。上皮组织中的细胞间空间由一种称为“紧密连接”的复杂生化结构所密封，该结构由多种蛋白质组成，包括跨膜蛋白、连接黏附分子、闭合蛋白、紧密连接蛋白(Claudin)、三细胞紧密连接蛋白和血管生成素，以及胞质内的闭锁小带支架蛋白。自1998年被发现以来，Claudin蛋白家族已被公认为紧密连接的关键组分，人类中已鉴定出27个家族成员。这些四跨膜蛋白最初是通过从鸡肝中分离紧密连接片段而得到表征，揭示了它们在调节细胞旁通透性中的重要作用。其中，CLDN-4最初被鉴定为产气荚膜梭菌肠毒素(CPE)的受体，该细菌毒素是导致人类食物中毒的元凶。值得注意的是，CLDN-4在人类胰腺癌中过表达，并且在人胰腺癌异种移植小鼠模型中使用CPE靶向CLDN-4，可在表达CLDN-4的细胞中产生剂量依赖性的细胞毒效应，从而为Claudin导向的癌症治疗提供了首个概念验证。在随后的十年中，使用人类癌症异种移植模型的进一步研究证实了这一潜力。 然而，将小鼠模型的临床前研究结果转化至人类的过程较为缓慢。考虑到Claudins的生理作用，靶向它们是否安全仍不明确。此外，开发能够特异性结合Claudins的分子(如抗体、小分子和肽)已被证明极具挑战性，这主要是因为Claudins在细胞表面仅暴露短的胞外环。近年来，在理解Claudins的生理学以及开发能够生成Claudin结合分子的技术方面取得的进展，推动了Claudin靶向癌症疗法的发展。2023年，首创的CLDN-18.2靶向单克隆抗体佐妥昔单抗获得美国食品药品监督管理局(FDA)优先审评资格，用于治疗难以治疗的转移性胃癌的生物制剂许可申请，并于2024年10月获得FDA批准。佐妥昔单抗的获批标志着Claudin靶向药物开发新时代的开始。本综述旨在概述Claudin结合剂开发及Claudin靶向癌症疗法的进展，并探讨从实验室到临床的转化研究相关要点。 Claudin蛋白家族的结构、分类与生理功能 哺乳动物Claudin家族由27种小分子膜蛋白组成，分子量为20至27千道尔顿，每种蛋白均具有四个跨膜结构域、两个胞外环结构域(ECL1和ECL2)以及一个胞内氨基末端和一个羧基末端结构域。ECL1和ECL2通常分别包含50个和约15个氨基酸，而四个跨膜结构域几乎占整个蛋白的一半。ECL1包含四个β-链和一个胞外螺旋，ECL2由一个β-链和跨膜蛋白TM3的胞外结构域组成。胞内的N-末端和C-末端结构域通常分别包含少于10个和25至55个氨基酸。许多(但非所有)Claudin的C-末端细胞质结构域包含一个保守的PDZ结构域结合基序，该基序在物种间高度保守，尤其是在人类和小鼠之间。该基序介导与闭锁小带支架蛋白ZO-1、ZO-2和ZO-3的PDZ结构域的直接相互作用。通过这些相互作用，闭锁小带蛋白将Claudins锚定在肌动蛋白细胞骨架上，并组织多蛋白复合物，这对于紧密连接的组装和稳定性至关重要。 在紧密连接中，Claudins的功能是密封相邻上皮细胞之间的细胞间空间。这种密封控制溶质穿过细胞间隙的通道(屏障功能)，并通过限制膜脂质和蛋白质在细胞膜上的侧向扩散来维持细胞极性(栅栏功能)。因此，紧密连接完整性的破坏会导致通透性增加和细胞极性丧失，从而引起一系列生理异常。在分子水平上，屏障和栅栏功能是通过Claudins组织成连续链来实现的，这些链由同一细胞内并排的顺式相互作用形成，而相邻细胞链之间的头对头反式相互作用则密封了细胞间空间。 Claudins的表达模式及其相应的生物学功能在组织间差异很大。许多Claudins在上皮细胞中表达，但其他的则存在于内皮细胞、神经细胞和生殖组织中。例如，CLDN-5主要在内皮细胞中表达，对维持血脑屏障的完整性至关重要；而CLDN-11在中枢神经系统的少突胶质细胞中表达，有助于髓鞘的形成，并在支持血睾屏障的Sertoli细胞中表达。此外，同一种Claudin可根据组织环境发挥不同作用。例如，CLDN-1在表皮中形成紧密的屏障功能以防止经皮水分流失，而在胆管细胞和肝细胞中，它则有助于维持肝胆管的屏障功能，防止胆汁盐泄漏。更广泛地说，Claudins在紧密连接中既可以作为细胞旁屏障，也可以作为选择性细胞旁通道。形成屏障的Claudins包括皮肤中的CLDN-1和血脑屏障中的CLDN-5，而CLDN-2和CLDN-15在肠道中形成Na+的细胞旁通道，CLDN-19在肾小管中形成Mg2+的细胞旁通道。 对Claudin基因敲除小鼠的研究揭示了其重要的生理功能。例如，敲除Cldn-5会导致胚胎致死，因为血脑屏障的破坏阻碍了脑内稳态的维持。Cldn-1的缺失同样致命，因为皮肤表皮屏障的破坏会诱导经皮水分流失和脱水。此外，CLDN-1、-5、-9、-10、-14、-16和-19的功能障碍与人类疾病的发生有关，包括偏瘫、耳聋、新生儿硬化性胆管炎等。对Claudins的综合分析将其分为四大类：第一类是形成自主紧密连接屏障的Claudins，包括CLDN-1、-3、-4、-5、-6、-7、-9、-11、-14、-18.1和-19；第二类是形成基于自主紧密连接屏障的细胞旁通道的Claudins，包括CLDN-2、-10a、-10b和-15；第三类是形成非自主紧密连接屏障的Claudins，包括CLDN-8、-12、-13、-16、-17及-20至-27；第四类是形成酸增强型紧密连接屏障的Claudins，包括CLDN-18.2。尽管Claudin基因缺失会导致紧密连接形成受阻和细胞旁屏障减弱，但细胞极性可以保持完整，这是因为另一种紧密连接相关蛋白JAM-A介导黏附接触，维持相邻细胞膜的紧密并置。然而，同时缺失Claudin和JAM-A基因则会消除这些膜并置，导致细胞极性丧失，表明Claudins和JAM-A在调节紧密连接组织和上皮极性方面具有不同但协同的作用。 Claudins在癌症中的表达与功能 一系列检测人类癌症中Claudin表达谱的研究表明，与良性肿瘤或健康组织相比，CLDN-1至-7、-9至-12、-14至-17、-18.1、-18.2、-19和-23的表达可上调或下调。例如，与正常胰腺细胞相比，CLDN-4在胰腺癌细胞中过表达，并通过增加细胞间接触的形成来减弱其转移活性。然而，CLDN-4表达水平较高的人群比表达水平较低的人群显示出更好的生存期。在结直肠癌中，CLDN-4的上调增强了屏障功能，但细胞旁通透性也同时增强。CLDN-4在胞质羧基末端的磷酸化会改变其定位，从细胞间接触点转移到细胞质，导致细胞旁通透性增强并诱导上皮-间质转化，这与肿瘤进展和转移相关。CLDN-4在胃肠型腺癌中强表达，但在弥漫型胃癌中表达较少。类似地，CLDN-1的表达也因肿瘤类型而异，在结直肠癌中过表达，但在前列腺癌和复发性乳腺癌中下调。 Claudins不仅是紧密连接的结构组分，还作为细胞内信号通路的活跃调节因子，调控肿瘤生物学的关键方面，包括增殖、侵袭、上皮-间质转化和治疗抵抗。例如，CLDN-1通过调节β-catenin信号和与上皮-间质转化相关的基因表达特征来促进结直肠癌的进展。在结肠癌细胞中，CLDN-1过表达诱导ZEB1，抑制E-钙黏蛋白，并增强迁移和转移行为。此外，胚胎性Claudins如CLDN-6在多种恶性肿瘤中异常表达，包括生殖细胞肿瘤和肝细胞癌，并与EGFR/AKT/mTOR信号级联的激活有关。除了表达水平，Claudins在癌症中的功能相关性还受到其细胞内运输和亚细胞定位的关键影响。Claudins通过网格蛋白介导的内吞、Rab GTPases介导的再循环和溶酶体降解等过程进行动态调节。异常的运输改变了它们在紧密连接处的可用性，破坏了上皮极性并促进癌症进展。例如，由于再循环受损导致的CLDN-1细胞内积累与结直肠癌侵袭性和转移增强相关，且其在肝转移中的核定位高于淋巴结转移。在黑色素瘤中，CLDN-1定位于细胞质。这种相互作用形成了一个反馈回路：致癌信号影响Claudin运输，而改变的运输进一步增强恶性信号。从治疗角度来看，理解Claudins(特别是CLDN-18.2)的膜动力学至关重要，因为它决定了单克隆抗体和嵌合抗原受体T细胞对其表面可及性。稳定Claudins在细胞表面或抑制其内化的方法可能会增强Claudin靶向疗法的疗效。 靶向Claudin的治疗策略：聚焦CLDN-18.2 尽管Claudins是明确的癌症治疗靶点，但一个主要问题是靶向Claudin的疗法是否安全，尤其是在转基因小鼠生理学敲除研究结果的背景下。目前，许多靶向CLDN-18.2、CLDN-6、CLDN-4和CLDN-1的药物已进入临床研究。 CLDN-18.2在胃癌(原发性和转移性)以及胰腺癌、食管癌、卵巢癌和肺部肿瘤中表达。CLDN-18.2的表达严格限于胃黏膜的分化上皮细胞，而在胃干细胞区和其他健康组织中不表达。因此，即使CLDN-18.2靶向药物在胃黏膜中引起靶点毒性，从幸存的干细胞库进行上皮再生也将支持组织修复。这些特征表明，在权衡临床风险与获益时，CLDN-18.2是一个临床上可接受的治疗靶点。此外，其在多种肿瘤类型中的表达模式突显了其作为泛癌种靶点的潜力。 目前，已开发出多种形式的CLDN-18.2靶向抗体药物，包括单克隆抗体、抗体药物偶联物、CLDN18.2导向的CAR-T细胞、抗CLDN-18.2与CD8 T细胞激活剂融合蛋白、靶向CLDN-18.2与PD-L1、CD47或CD3的双特异性抗体，以及封装编码抗CLDN-18.2抗体的RNA的脂质纳米颗粒。 在抗体药物中，进展最为领先的是佐妥昔单抗，这是一种结合CLDN-18.2胞外环的单克隆抗体，通过抗体依赖性细胞毒性发挥作用。两项多中心、随机、双盲的III期研究(SPOTLIGHT和GLOW)证实了其在CLDN-18.2阳性、HER2阴性、局部晚期不可切除或转移性胃癌或胃食管结合部腺癌患者中的临床效用。靶向CLDN-18.2的佐妥昔单抗联合标准化疗与安慰剂联合标准化疗相比，延长了无进展生存期和总生存期。尽管不良事件常见，但被认为在临床上可控。佐妥昔单抗于2024年10月成为首个FDA批准的Claudin靶向疗法。Osimetamab是另一种重组人源化抗CLDN-18.2单克隆抗体，具有高亲和力。由于其Fc区岩藻糖基化程度降低，Osimetamab增强了Fc受体的结合，从而与佐妥昔单抗衍生物相比，具有更强的抗体依赖性细胞毒性、补体依赖性细胞毒性和抗体依赖性细胞吞噬作用。在I/Ia期临床研究中，Osimetamab显示出可控的安全性。在另一项I/IIa期研究的队列G数据表明，Osimetamab联合卡培他滨、奥沙利铂和纳武利尤单抗作为晚期胃癌或胃食管结合部癌的一线治疗，在CLDN-18.2高、中表达人群中实现了68%的客观缓解率和12.6个月的无进展生存期。此外，其他几种靶向CLDN-18.2的单克隆抗体，包括AB011、MIL93、SPX-101、LM-102和FL-301，也已进入早期临床研究阶段。 抗体药物偶联物是另一类积极研究的治疗模式。CMG901是一种CLDN-18.2导向的ADC，由人源化单克隆抗体通过可裂解连接子与细胞毒性载荷单甲基澳瑞他汀E偶联而成，药物抗体比为4。临床前研究证实了其由MMAE诱导的细胞毒性介导的强效抗肿瘤活性，以及旁观者效应和免疫效应功能的参与。在I期临床研究中，CMG901显示出可控的安全性，并在CLDN-18.2阳性胃癌或胃食管结合部癌患者中实现了29%的客观缓解率和65%的疾病控制率。目前，CMG901正在一项关键的III期临床研究中进行评估。IBI343是另一种处于临床开发阶段的靶向CLDN-18.2的ADC。它由全人源抗CLDN-18.2单克隆抗体通过可裂解连接子定点糖基化偶联拓扑异构酶I抑制剂依喜替康而成。与某些CLDN-18.2导向抗体不同，IBI343采用了IgG1 Fc沉默技术以减弱抗体依赖性细胞毒性和补体依赖性细胞毒性，旨在限制正常胃黏膜中的免疫介导的靶点毒性，同时保留载荷介导的抗肿瘤活性。在I期临床剂量扩展阶段，超过40%的参与者已接受过两线前期治疗，38.3%接受过三线或以上。在此背景下，IBI343实现了29.0%的确证客观缓解率和90.3%的疾病控制率。基于这些结果，一项III期临床研究正在进行中。其他几种靶向CLDN-18.2的ADC，如TQB2103、CPO102、LM-302、RC118、AZD4360和XNW27011，也已进入早期临床评估。 双特异性抗体是设计用于同时结合两个不同靶点的工程分子，能够协调调节肿瘤细胞和免疫微环境。Q-1802是一种靶向CLDN-18.2和免疫检查点PD-L1的双特异性抗体，目前正在II期临床研究中评估。初步临床数据显示了令人鼓舞的抗肿瘤活性。在10 mg/kg Q-1802联合CAPOX治疗组中，70%的患者观察到部分缓解。PT886是一种同时靶向CLDN-18.2和CD47的双特异性抗体，通过结合肿瘤细胞上的CLDN-18.2，同时阻断CD47介导的抑制性信号，促进巨噬细胞对CLDN-18.2阳性癌细胞的选择性吞噬。PT886目前正在胃或胃食管结合部癌及胰腺癌患者的I/II期临床研究中进行评估。另一类独特的CLDN-18.2导向双特异性抗体是靶向CLDN-18.2和CD3的T细胞衔接器，包括Gresnontimab、QLS31905、IBI389、ASP2138和AZD5863。这些药物旨在通过同时结合癌细胞上的CLDN-18.2和T细胞上的CD3，在肿瘤部位募集并激活T细胞，从而促进T细胞介导的肿瘤细胞杀伤。Gresnontimab的I期研究因故终止。QLS31905的最新临床数据显示，在33名CLDN-18.2阳性肿瘤患者中，客观缓解率为18.18%，疾病控制率为87.88%。IBI389在胃癌和胰腺导管腺癌中也报告了初步疗效数据，在胃癌中客观缓解率为30.8%，疾病控制率为73.1%；在胰腺癌中客观缓解率为30.4%，疾病控制率为69.6%。 CAR-T细胞是另一种前景广阔的治疗模式。工程化改造以识别CLDN-18.2的CAR-T细胞，如CT041，在CLDN-18.2阳性胃癌患者来源的异种移植小鼠模型中显示出强抗肿瘤活性，且对正常器官(包括胃组织)无明显影响。在包含98名参与者的I期临床研究中，CT041实现了38.8%的客观缓解率和91.8%的疾病控制率。无进展生存期和总生存期分别为4.4个月和8.8个月。细胞因子释放综合征在96.9%的患者中观察到，但均为1/2级。在Ib/II期研究中，CT041治疗组在意向治疗人群中的中位无进展生存期为3.25个月，而医生选择治疗组为1.77个月；中位总生存期分别为7.92个月和5.49个月。其他Ib/II期临床研究正在进行中，另有几种CLDN-18.2靶向CAR-T细胞也在开发中。其他新兴策略包括TAC01-CLDN18.2，这是一种T细胞抗原偶联器，设计用于以MHC非依赖性方式将内源性T细胞重定向至肿瘤细胞，同时保留生理性T细胞信号传导；LB4330，一种靶向CLDN-18.2和IL-10的双功能分子；以及BNT141，一种封装编码抗CLDN-18.2抗体的RNA的脂质纳米颗粒，可在体内产生治疗性抗体。 在比较不同治疗模式时，尽管目前有多种靶向CLDN-18.2的治疗模式处于临床开发中，但迄今仅单克隆抗体佐妥昔单抗获得监管批准。在肿瘤药物开发中，实现安全性和有效性之间的适当平衡始终是核心考量，特别是对于Claudin这类在正常组织中表达的靶点。因此，对于Claudin靶向治疗，选择性递送至肿瘤组织同时限制健康上皮暴露至关重要。CLDN-18.2在这方面是一个相对有利的靶点，因为其在健康组织中的表达仅限于分化的胃上皮细胞，而胃干细胞区不表达。利用这种表达模式的疗法(如抗体和ADC)可将胃肠毒性降至最低。相比之下，基于免疫的模式(如T细胞重定向疗法)需要仔细评估药代动力学和药效学，以确保充分的肿瘤靶向而不产生过度的靶点毒性。迄今为止的临床经验表明，抗体疗法是目前靶向CLDN-18.2临床验证最为充分的方法。同时，开发基于免疫的模式(如CAR-T细胞、双特异性T细胞衔接器和双特异性抗体)对于明确其治疗潜力和最佳临床定位至关重要。然而，它们对实体瘤的临床疗效目前有限，表明该领域需要进一步的技术进步。目前，靶向CLDN-18.2的在研ADC(如CMG901)显示出比佐妥昔单抗更强的抗肿瘤活性，表明ADC可能代表最有前景的模式之一。 鉴于CLDN-18.2的表达严格限于胃黏膜的分化上皮细胞，CLDN-18.2靶向疗法预期的靶点导向、肿瘤外毒性主要为胃肠道毒性。在佐妥昔单抗的III期GLOW研究中，呕吐和恶心是仅有的两组间发生率差异超过10%的全等级治疗中出现的不良事件。在CMG901的I期剂量扩展部分，常见的胃肠道相关不良事件为呕吐和恶心。在IBI343的I期研究中，常见的胃肠道相关不良事件与其他CLDN-18.2靶向疗法相比较轻。这种较轻的不良事件可能归因于IBI343的Fc沉默技术，该技术减弱了抗体依赖性细胞毒性和补体依赖性细胞毒性活性。 目前，唯一获批用于佐妥昔单抗患者筛选的伴随诊断是Ventana CLDN18 (43-14A) RxDx检测，这是一种免疫组织化学检测。在佐妥昔单抗的两项关键III期研究中，CLDN-18.2阳性的入组标准均定义为通过该免疫组织化学检测，至少75%的肿瘤细胞呈现中强度膜染色。该截断值是在II期FAST研究中定义的。FAST研究入组了晚期胃癌或胃食管结合部癌及食管腺癌患者，要求至少40%的肿瘤细胞呈中强度膜染色。亚组分析显示，在≥70%肿瘤细胞中表达中高强度CLDN-18.2的患者中，无进展生存期和总生存期显著获益；而在40%至69%阳性的患者中，无显著差异。该75%的截断值依赖于病理学家的评估，与其他免疫组织化学生物标志物一样，存在一定程度的观察者间变异性。Ventana检测的分析和临床表现已有报告，分析验证显示高精度，临床验证在SPOTLIGHT和GLOW研究中得到确认。佐妥昔单抗也正在考虑用于转移性胰腺腺癌，但鉴于CLDN-18.2在胰腺癌中的表达水平低于胃癌，是否适用相同的截断值尚不明确，可能需要进一步详细评估。 靶向CLDN-6及其他Claudins CLDN-6是另一个有前景的癌症治疗靶点，特别是在胚胎起源的肿瘤中，如睾丸癌和卵巢癌。与CLDN-18.2不同，CLDN-6在人类胚胎干细胞和诱导多能干细胞中高表达，在卵巢癌、肺癌、子宫内膜癌和胃癌中也高表达，但在健康体细胞组织中表达极低，使其成为一个有吸引力的靶点。目前，多种靶向该Claudin的方法正在开发中，包括单克隆抗体、含有编码CLDN-6和CD3双特异性抗体RNA的脂质纳米颗粒、双特异性T细胞衔接器和ADC。一项抗CLDN-6抗体IMAB027的II期研究在不可治愈的铂类难治性生殖细胞肿瘤患者中完成，但单药治疗未显示临床获益，尽管耐受性良好。由于CLDN-6和CLDN-9的胞外环结构域非常相似，IMAB027也与CLDN-9相互作用，鉴于CLDN-9在骨骼肌、骨骼、心血管系统和脑中表达，临床应用时需考虑潜在不良反应。开发CLDN-6特异性抗体是临床应用的未来挑战。BNT142是一种封装编码靶向CLDN-6和CD3的双特异性T细胞衔接器RNA的脂质纳米颗粒，临床前研究显示其能诱导强烈肿瘤消退且无不良反应，并特异性结合CLDN-6，与CLDN-9结合较弱。目前，BNT142正在I/II期临床研究中。AMG794是一种半衰期延长的CLDN-6和CD3双特异性T细胞衔接器，在食蟹猴中耐受性良好，并在肺癌和卵巢癌异种移植模型中抑制肿瘤生长，但其I期研究已终止。TORL-1-23是一种靶向CLDN-6的ADC，由人源化抗CLDN-6单抗通过缬氨酸-瓜氨酸连接子偶联MMAE，药物抗体比为4。在CLDN-6阳性卵巢癌患者中，在2.4 mg/kg和3.0 mg/kg剂量下，客观缓解率分别为67%和50%。I期研究显示在卵巢癌、子宫内膜癌和睾丸癌患者中具有良好安全性和初步疗效，客观缓解率在0.2-3.0 mg/kg剂量范围内为33%。基于这些积极发现，一项II期注册研究正在进行中。此外，BNT211-01研究正在评估CLDN-6 CAR-T细胞联合或不联合RNA疫苗，毒性可控，在可评估患者中未确证的客观缓解率为33%，疾病控制率为67%，其中生殖细胞肿瘤患者在高剂量水平下反应率最高(57%)。这些发现突显了Claudin靶向CAR-T疗法的可行性以及RNA疫苗介导的CAR-T细胞扩增作为实体瘤新型策略的潜力。 产气荚膜梭菌肠毒素CPE是首个被鉴定的能结合Claudin(特别是CLDN-3和CLDN-4)的细胞毒性分子，其C端受体结合域C-CPE是首个表征的CLDN-3和CLDN-4结合支架。在携带人胰腺癌异种移植瘤的小鼠中，瘤内给予CPE可抑制肿瘤生长且无明显不良效应，表明CLDN-4是胰腺癌治疗的潜在靶点。然而，全身注射CPE对小鼠有毒性，表明安全性是Claudin靶向癌症疗法的关键问题。CLDN-3和CLDN-4在中枢神经系统中不表达，但脑转移的乳腺肿瘤常表达CLDN-3和CLDN-4，颅内注射CPE可减少转移灶大小且无中枢神经系统毒性。C-CPE还被探索作为增强抗癌药物瘤内递送和疗效的工具，放射性标记的C-CPE已被评估为胰腺癌成像探针。此外，将C-CPE与细胞毒性载荷融合的构建体已被开发用于选择性靶向表达CLDN-3和CLDN-4的癌细胞，并显示出细胞毒活性，能抑制CLDN-4阳性B16黑色素瘤细胞的肺转移。C-CPE还与金纳米颗粒偶联以实现靶向光热疗法。ASP1002是一种靶向CLDN-4和共刺激分子CD137的双特异性抗体，为提高安全性，其包含沉默Fc区以避免Fc/FcγR介导的交叉链接，目前正处于I期临床研究中。非连接型CLDN-1的抗体在临床前研究中显示出抑制肝癌发生和纤维化的潜力，且不影响CLDN-1介导的紧密连接完整性，表明其安全性。ALE.C04是一种靶向非连接型CLDN-1的单克隆抗体，能损害CLDN-1阳性肿瘤细胞与基质细胞的相互作用，增加免疫细胞浸润，目前正在I/II期研究中。CLDN-12已成为克服癌症免疫抑制的潜在治疗靶点。此外，积累的证据表明Claudins可能作为癌症诊断的生物标志物，例如胆管癌胆汁中CLDN-3阳性细胞外囊泡增加，结直肠癌肝转移患者中检测到CLDN-2细胞外囊泡等。 Claudin靶向癌症治疗的临床意义、挑战与展望 CLDN-18.2过表达在早发性或弥漫型组织学类型的胃癌中更为常见，包括硬质胃癌，这些亚型通常对现有的靶向疗法如抗HER2或抗PD-1/PD-L1药物反应较差。在81名硬质型胃癌患者中，28名(34.6%)为CLDN-18.2阳性，且CLDN-18.2阳性与其他可作用生物标志物(如HER2、错配修复和PD-L1)重叠较少。因此，抗CLDN-18.2疗法有望满足胃癌中有效靶向选择有限的患者的未竟临床需求。胰腺癌已被确定为CLDN-18.2靶向疗法的另一个主要适应症。传统上，治疗靶点主要聚焦于直接参与癌细胞生存或增殖的分子，而Claudin是紧密连接蛋白，与癌细胞生存或增殖的相关性有限。佐妥昔单抗通过抗体依赖性细胞毒性和补体依赖性细胞毒性发挥抗肿瘤活性。靶向CLDN-18.2的临床成功将治疗视野扩展至细胞间黏附分子。CLDN-18.2通过计算机筛选被鉴定为谱系特异性靶点，这类靶点对于基于细胞的疗法尤其具有吸引力。CLDN18.2导向CAR-T疗法的随机II期研究显示优于标准化疗的结果。 在挑战方面，大多数Claudins在全身上皮中表达，基因敲除小鼠表现出多种异常表型，因此安全性，特别是胃肠道毒性，是CLDN靶向疗法开发中的主要考量。在佐妥昔单抗的临床开发中，胃肠道相关不良事件频繁报告。为理解这些毒性机制并评估缓解策略，在雪貂中进行了临床前研究，佐妥昔单抗治疗在所有雪貂中诱导了呕吐，Fosaprepitant能有效抑制呕吐，四种药物联用可减轻胃组织损伤。管理佐妥昔单抗诱导的胃炎仍是将其纳入临床实践的主要挑战。另一个挑战是生成安全性评估平台。如果使用抗鼠Claudin抗体来评估CLDN靶向药物在小鼠癌症模型中的获益-风险比，则从小鼠研究到临床研究的转化研究可以相应地进行判断，但鼠Claudin抗体的开发仍是一个瓶颈。替代方法是生成人Claudin基因敲入小鼠或使用人Claudin靶向抗体进行非人灵长类实验。另一个瓶颈是开发抗体之外的Claudin靶向模式，如蛋白质、适配体、肽和化学药物。已建立了基于时间分辨荧光共振能量转移的高通量筛选系统和基于生物素化脂质体的相互作用分析系统，可用于Claudin结合分子的高通量筛选。计算机对接模拟是另一种生成Claudin结合剂的方法，通过此方法已鉴定出一种能抑制异种移植小鼠肿瘤生长的CLDN-1化学结合剂。 展望未来，佐妥昔单抗的临床获批确立了Claudins，特别是CLDN-18.2，作为癌症可行的治疗靶点，并验证了紧密连接组分作为先前未充分开发的药物靶点类别。不同于基于致癌依赖性选择的传统肿瘤学靶点，CLDN-18.2代表了一种组织相关抗原，其治疗价值源于受限的生理表达和上皮极性丧失后的肿瘤相关可及性。这种概念上的转变将可靶向脆弱性的范围扩展到包括肿瘤细胞的结构和空间特征。未来的优先事项是生成高特异性的Claudin结合剂，并改进对Claudin表达模式、亚细胞定位和动态调控的理解，这对于患者选择和风险缓解至关重要。从转化角度看，开发更具预测性的临床前模型，如人Claudin基因敲入动物或物种匹配的Claudin结合剂，对于评估靶点毒性和治疗窗口至关重要。最后，靶向模式的持续创新，包括小分子、肽和适配体，可能进一步拓宽Claudin导向策略的适用性。总之，这些进展表明Claudins和更广泛的紧密连接组分有望成为癌症治疗格局中不可或缺的组成部分。随着该领域的发展，将结构细胞生物学与药物设计和临床肿瘤学相结合将是实现这类新兴靶点全部潜力的关键。 参考文献：Niwa Y, Matsushita S, Nakayama I, Kondoh M. Targeting claudins in cancer. Nat Rev Drug Discov. 2026 May 28. doi: 10.1038/s41573-026-01450-2. Epub ahead of print. PMID: 42209790. 本文仅供医学学术交流，不构成诊疗建议，不能替代专业医生面诊。详细免责声明请点击菜单栏查阅。

全球首个！IBI343申报上市——CLDN18.2 ADC即将改写胃癌治疗版图 2026年6月4日，信达生物宣布其自主研发的IBI343——全球首个靶向CLDN18.2的ADC药物——新药上市申请（NDA）获国家药品监督管理局（NMPA）受理，并被纳入优先审评。 这一事件具有明确的里程碑意义：全球首个进入监管审查阶段的CLDN18.2 ADC。与此同时，IBI343在胰腺癌领域的布局也在同步推进，让这个分子的想象空间远不止于胃癌。G-HOPE-001：支撑NDA的关键III期数据 IBI343的NDA基于G-HOPE-001 III期临床研究，旨在评估IBI343在CLDN18.2阳性、至少接受过两线治疗的晚期胃或胃食管结合部腺癌患者中的疗效与安全性。该研究达到主要终点，具体数据将在近期学术会议上公布。 IBI343的设计颇具特色：糖基化CLDN18.2特异性抗体 + 拓扑异构酶I抑制剂（exatecan）payload + 可裂解连接子，DAR值约为4。与第一代ADC使用的MMAE（微管抑制剂）payload不同，exatecan作为拓扑异构酶I抑制剂具有更强效的细胞毒性活性和不同的旁观者效应。CLDN18.2赛道三线并进：单抗 vs 双抗 vs ADC CLDN18.2是胃癌领域过去五年最炙手可热的靶点之一，目前形成了三条清晰的竞争路线： 路线 代表药物 现状 特点 单克隆抗体 Zolbetuximab（安斯泰来） 中国已获批 联合化疗一线胃癌 双特异性抗体 Spevatamig（CLDN18.2/CD47） II期胰腺癌 mOS 14.7月 ADC IBI343（信达） NDA优先审评 全球首个CLDN18.2 ADC NDA CLDN18.2在胃癌中的阳性率约为30-50%，而在胰腺癌中阳性率更高，达到50-70%。这为IBI343从胃癌向胰腺癌的跨瘤种扩展提供了强有力的生物学基础。信达已在胰腺癌后线治疗中布局了IBI343的临床研究，如果数据积极，胰腺癌将成为这一分子的第二增长曲线。中国ADC军团在CLDN18.2赛道的全球地位 IBI343的NDA只是中国CLDN18.2 ADC军团的一个缩影。目前在该赛道上，中国药企的布局深度和广度全球无出其右： - 信达生物 IBI343：NDA阶段，exatecan payload - 科济药业 AB011：CLDN18.2 CAR-T + ADC，I期 - 康诺亚 CMG901：CLDN18.2 ADC，I/II期 - 石药集团 SYSA1801：CLDN18.2 ADC，授权Elevation Oncology - 礼新医药 LM-302：CLDN18.2 ADC，授权Turning Point/BMS 在CLDN18.2这个靶点上，中国企业已经从"跟随者"变成了"引领者"。全球范围内，进入关键临床阶段的CLDN18.2 ADC中，中国企业的比例超过70%。这不仅是单一药物层面的领先，更代表了中国在ADC技术平台上的系统性优势。CLDN18.2 ADC vs 单抗：下一代疗法已在路上 Zolbetuximab联合化疗一线治疗CLDN18.2阳性胃癌已在中国获批，但单抗的局限性也显而易见：仅约30-40%的ORR、需联合化疗、无跨瘤种证据。 ADC的优势在于"精确制导+核弹载荷"——抗体部分负责精准定位CLDN18.2阳性细胞，payload则释放强效细胞毒性直接杀伤肿瘤，旁观者效应则进一步扩大杀伤范围。理论上，ADC可以在CLDN18.2表达水平较低的患者中同样产生抗肿瘤活性，这大大扩展了适用人群。 如果IBI343顺利获批，CLDN18.2赛道的格局将从"单抗独大"进入"ADC与单抗分治"的新阶段，届时患者将有更精准、更有效的分层治疗选择。 关于达安欣 上海达安欣生物医药有限公司 专注 RAS 通路靶向原料药研发与生产 全球首家获 FDA DMF 认证的 Daraxonrasib 原料药企业 关注本号，回复「RAS」获取 Daraxonrasib 技术资料