LCN2

神经科学研究走向单细胞似乎是一个自然的选择单细胞多组学技术——破解神经科学研究复杂性的利器由于大脑结构和功能复杂，神经科学研究本身就很复杂。人脑包含数十亿个神经元和数万亿个突触连接，每个神经元在其作用、基因表达和连接方面都可能独一无二。这种细胞多样性，加上神经回路内的动态相互作用，使得理解大脑功能成为一项艰巨的挑战。传统上，研究分析的是细胞群或整个大脑区域，平均信号忽略了单个细胞的细微行为。然而，谱系追踪、功能基因组学、连接组映射或是关注发育和疾病的关联已经成为神经科学研究的新兴趋势，这都在逐渐转向对大脑更详细更高分辨率的理解。单细胞技术，例如单细胞 RNA 测序 (scRNA-seq)，使得研究单个细胞的分子特征变得可行，因此也特别适合神经科学。单个细胞的高分辨率可以揭示大量组织分析所掩盖的细节，例如细胞群内的多样性；通过每个细胞转录组的详细视图，可以识别不同的细胞类型、状态和调控网络；在单细胞水平上整合转录组学、表观基因组学和蛋白质组学，也可以提供细胞功能的更全面的图像；甚至可以通过CRISPR 等工具在单细胞中进行靶向的基因编辑，将特定基因与其功能结果联系起来。这些对于剖析大脑的异质性、连接性和动态过程都将是有帮助的。现有单细胞技术应用于神经研究还有不足单细胞技术在神经科学中的应用相对还不够成熟，仍然存在不少挑战。目前的单细胞技术在应对大脑数十亿个细胞这样庞大的细胞量方面还比较吃力，这需要耗费大量资源且成本高昂。对大脑区域或整个大脑的全面研究似乎还不太可行，因此这往往也会遗漏罕见的细胞类型或不同人群之间的细微差异。传统的单细胞技术成本并不低，尤其是需要扩大规模或者是与其他多组学方法相结合时，这限制了其只能在资金充足的实验室中使用。此外，在单细胞层面整合这些不同的数据类型（多组学）会进一步增加复杂性，这些数据集的分析和解读都极具挑战性，需要先进的计算专业知识，而这些专业技能也并非普遍可用的。最初单细胞数据通常可以揭示新的或罕见的细胞亚型，但将这些亚型与特定功能（例如神经元活动或行为）或发育起源联系起来。然而多年单细胞数据的积累，探索了多种器官的细胞多样性。尽管如此准确分类和注释细胞类型可能并不容易，这会导致分子见解与功能理解之间存在差距。单细胞数据通常可以揭示新的或罕见的细胞亚型，但将这些亚型与特定功能（例如神经元活动或行为）或发育起源联系起来还有一定的挑战。近几年单细胞数据的积累，逐渐探索了多种器官的细胞多样性。尽管如此，准确分类和注释细胞类型可能并不容易，这会导致分子见解与功能理解之间存在差距。换个角度讲，在可扩展性、空间保存、数据处理和功能关联等方面的任何一项创新的技术和解决方案将能进一步推动单细胞技术在神经科学领域的适用和采用。Illumina单细胞解决方案开始应用于神经研究在回答Illumina的单细胞技术是否适合神经科学研究之前，我们需要先了解Illumina的单细胞技术原理及独特性。Illumina单细胞技术利用粒子模板即时分区测序 (PIPseq)，这是一种可以用于scRNA-seq的非微流体技术。该方法最初由 Fluent BioSciences开发（2024 年被 Illumina 收购），其使用条形码水凝胶模板来创建均匀的液滴乳液，从而无需复杂的微流体装置。2023 年的nature biotechnology出版物描述了PIPseq的核心方法。从感兴趣的组织或细胞培养物中制备单细胞悬浮液开始，引入带条形码的水凝胶模板（称为 PIP），在细胞悬浮液与PIP混合之后，添加油并简单涡旋即可产生均匀的液滴乳液。这个过程可在微孔板或锥形管等不同形式下进行，无需专门设备。理想情况下每个液滴只包裹一个细胞和一个PIP条形码珠。加热乳液可使细胞裂解并释放 mRNA，每个液滴内的条形码珠子会捕获 mRNA。随后的逆转录在液滴内进行，将捕获的 mRNA 转换成条形码 cDNA。乳剂被打破，条形码 cDNA 被汇集在一起，进行标准文库制备步骤，包括扩增和接头连接，以制备用于测序的 cDNA。2024 年发表的bioRxiv预印本引入了PIPseq V，对上述的原始技术进行了增强。PIPseq V实现了高达85％的细胞捕获效率，在降低背景噪音的情况下可以检测到每个细胞的更多基因，每次实验支持处理最多 100 万个细胞，能够与转录组学一起整合其他单细胞分析（例如表观基因组学或蛋白质组学）。本质上，PIPseq开发了无需微流体、无需前置设备的微液滴生成方式，降低了复杂性和成本，易于使用。这种微液滴的方式可以与多种样本类型、测序平台、多组学方法相兼容，同时具有良好的可扩展性，可以在一次实验中处理数千到数百万个细胞。需要指出的是，PIPseq方法适用于包括神经元或脂肪组织细胞等具有挑战性的样本，由于这些细胞独特的大小、形态、脆弱性以及容易结块等，使用传统的微流体系统经常会出现堵塞的问题。另一方面，由于不需要微流体，PIPseq可以在采集点处理新鲜样本，这非常适合临床或现场应用，传统的方法由于涉及到微流体设备的使用，通常需要将样本采集冻存后送至实验室再做单细胞的分选。可扩展性、成本效益、易于使用和访问，以及在处理神经元细胞等棘手样本上的能力，使得PIPseq成为样本质量至关重要的神经科学应用的一个不错选择。来自于早期用户的真实经验分享纽约大学的 Shane Liddelow 博士和他的团队已经将 Illumina 的 PIPseq 用于神经科学研究，特别是星形胶质细胞的研究。星形胶质细胞是一个因为细胞大小较难捕获的细胞类型，而且星形胶质细胞异质性极强，导致这些细胞在大多数数据集中的代表性严重不足。他在不同场合分享展示了利用Illumina 的PIPseq单细胞 RNA 测序技术如何解决可扩展性和细胞捕获等问题，因此产生了星形胶质细胞生物学的关键见解。Liddelow 博士的实验室与 Fluent BioSciences 首先合作评估并强调了 PIPseq 在处理大脑等复杂组织样本方面的有效性和能力。PIPseq这种无微流体设计避免了神经元细胞常见的堵塞问题，同时特别适用于处理时间敏感样本（如新鲜分离的脑细胞）。PIPseq可以实现大规模的单细胞捕获，支持新鲜/冷冻组织、细胞悬液和细胞核输入，尤其适用于老年脑组织和冷冻保存样本，避免了传统方法中细胞解离导致的转录偏差。老化的大脑因为脂肪组织和髓鞘堆积而通常很难分离和捕获单细胞，从而使 scRNAseq 的样品制备变得困难且不可靠。在传统的基于微流体的单细胞操作中，这些过量的非细胞成分和碎片可能会堵塞微流控的管道，通常需要使用 FACS 或磁珠进行多轮清洗。PIPseq技术对碎片的容忍度更高，一般通过简单的过滤就可以进行后续制备，也不需要额外的多轮清洗，对细胞更友好，也避免了基因表达伪影的情况。此外，PIPseq可用于从各种组织和实验条件下测序细胞核。从细胞中提取细胞核是单细胞分析的一个重要用例，因为细胞核通常是病理样本（通常从组织库中获取新鲜冷冻的组织块）或难以进行简单酶解的老化组织的首选输入。Liddelow 团队的数据表明PIPseq能够在一个反应中大规模稳健高效地捕获老化小鼠大脑中的数十万个细胞核，并生成足够高质量的数据来清晰地识别和聚类脑细胞类型。以上这些优势提示，PIPseq可以从脑组织中获取完整的细胞数据、可以很好地适用于神经科学研究。通过将PIPseq与主流商业平台10x Genomics进行直接对比（相同样本、相同测序深度），Liddelow 团队验证了PIPseq的性能。在小鼠脑样本中，PIPseq捕获了相似的细胞类型比例（如兴奋性神经元、星形胶质细胞），并检测到一致的差异表达基因。结果显示两者在细胞类型捕获率、基因检测灵敏度和差异表达分析结果上高度一致（Pearson相关系数r²=0.79）。此外，跨平台的PIPseq单细胞测序（Illumina vs. Ultima）也显示较高的数据一致性和兼容性。Liddelow 团队利用 Illumina 的 scRNA-seq 识别了多种神经细胞亚群，每种细胞都有独特的分子特征。例如在LPS诱导的炎症模型中，PIPseq识别出6,332个反应性星形胶质细胞亚群，富集了Serpina3n、Lcn2等炎症标志物，而这些细胞在其他 scRNAseq 数据集中通常代表性不足。同时，这一结果也提示，PIPseq适用于研究炎症、神经退行性病变和神经发育等条件下的细胞类型特异性反应。Liddelow 团队也提示了PIPseq对遗传扰动的敏感性。PIPseq 检测到转基因小鼠模型（包括 Clu 基因敲除小鼠）和病毒诱导的转基因模型中的基因表达变化。在Clu基因敲除小鼠中，PIPseq检测到Clu表达降低，但未完全消失，提示该基因可能存在未被报道的剪接变体；发现泛素-蛋白酶体通路基因（如Ubb-ps）的异常表达，揭示了Clu缺失的潜在机制。PIPseq对细微遗传修饰的敏感性也为神经退行性疾病、脑损伤和脑胶质瘤等研究提供了新工具。在发表的预印本文章中，Liddelow 团队还证明了PIPseq跨物种与非传统模型的应用。PIPseq被成功应用于鳐鱼（Leucoraja erinacea）脊髓和背根神经节，识别出组织特异的标记基因（如fabp7b、neflb）。非传统模型（如鳐鱼）的适用性为比较解剖学和进化发育提供了新视角，为跨物种比较与进化研究提供了新工具。总体上来说，Illumina的PIPseq单细胞解决方案通过简化流程和降低成本，被证明可以成为神经科学研究中强有力的单细胞工具，尤其在处理复杂组织、稀有细胞和跨物种样本时展现出的独特优势。如果这一解决方案广泛应用，其将加速基础研究和临床转化，推动对神经系统疾病和发育机制的深入理解。未来还需要持续探索Liddelow团队的研究为使用低成本、无微流体且可扩展的 PIPseq 研究跨年龄、脑区、实验应用和物种的神经系统组织提供了一个测试案例。与其他商业系统的高进入门槛、严格的样本量和高成本相比，PIPseq 可以生成可比且性价比更高的测序数据。除了Liddelow 团队展示的Illumina单细胞解决方案在星形胶质细胞研究上的应用，Illumina PIPseq单细胞解决方案还将为神经科学研究提供变革性的潜力，比如用于绘制脑细胞多样性图谱以识别和分类以前未知的细胞类型、用于跟踪单个细胞随时间推移的基因表达变化、用于精确定位与疾病进展相关的细胞及分子变化、用于展示神经活动如何改变单个神经元的基因表达/研究神经可塑性和学习能力、用于研究小胶质细胞和大脑中的其他免疫细胞在健康和疾病中反应，等等。而在神经科学之外， PIPseq也可以被探索应用于发育生物学、免疫学和癌症研究等多个领域，将为加深对多种疾病的了解和开发创新治疗方法提供基础性探索性工具。本文转自我是建设者公众号参考：https://doi.org/10.1038/s41587-023-01685-zhttps://doi.org/10.1101/2023.07.14.549051https://doi.org/10.1101/2024.10.04.616561https://www.illumina.com/events/webinar/2024/building-new-era-cell-biology-multiomics-discovery-tools.htmlhttps://www.fluentbio.com/wp-content/uploads/2022/10/PIPseq%E2%84%A2-Reveals-Neuronal-and-Glial-Cell-Diversity-in-Freshly-Dissociated-Mouse-Brain-1.pdfhttps://doi.org/10.21203/rs.3.rs-3428910/v1.

编者按 2024年12月7日至10日，第66届美国血液学会（ASH）年会在美国圣迭戈隆重召开，全球血液学专家学者齐聚一堂，共同对血液领域最新研究进展进行深入探讨与交流。在本次ASH盛会上，陆军军医大学第二附属医院（新桥医院）血液病医学中心宋清晓教授团队3项研究入选（O263、P3391、P4777），其中2项研究荣获ASH摘要成就奖（Abstract Achievement Awards），为慢性移植物抗宿主病的治疗提供了新的思路与可能。《血液时讯》特邀宋清晓教授进行深度解读，以飨读者。 获奖摘要 针对皮肤慢性移植物抗宿主病中低氧微环境的PI3Kδ抑制疗法 O263 Targeting the Hypoxic Microenvironment in Cutaneous Chronic Graft-Versus-Host Disease through PI3Kd Inhibition 【滑动查看研究内容】 皮肤慢性移植物抗宿主病（cGVHD）是同种异体干细胞移植（allo-HSCT）后的一项重大挑战，严重影响患者的生活质量和长期生存。cGVHD的发病机制涉及供体免疫细胞与受体组织之间的复杂相互作用。这种炎症环境中，T细胞、B细胞及其相关自身抗体、巨噬细胞和各种细胞因子起着核心作用。然而，cGVHD免疫微环境中精确的细胞相互作用机制尚未完全阐明。 为探索这一问题，我们首先建立了硬化性皮肤慢性移植物抗宿主病（Scl-cGVHD）小鼠模型。将致死剂量辐照的BALB/c小鼠移植了来自次要组织相容性抗原（miHA）不匹配的B10.D2供体的脾细胞与骨髓细胞的混合细胞。与同基因对照组相比，接受allo-HSCT的小鼠出现体重减轻、脱毛，并在第60天时死亡率高达80%。H&E染色和马松染色显示，cGVHD皮肤中存在免疫细胞浸润和纤维化。随后，使用空间转录组学、多重免疫荧光染色、蛋白质印迹分析和流式细胞术，对cGVHD患者和Scl-cGVHD小鼠的皮肤免疫微环境进行了深入分析。 研究表明，cGVHD皮肤病变区域显示缺氧的特征，伴有PI3K-AKT信号通路活化及以Th2细胞扩增，以及与淋巴细胞迁移的趋化因子及其受体表达明显增高。cGVHD皮肤病变区域以T细胞、巨噬细胞为主，伴有少量B细胞浸润的独特空间模式，促进IL-13介导的持续上皮细胞缺氧，缺氧的上皮细胞与巨噬细胞之间的互作导致皮肤cGVHD不可逆转的纤维化。 本研究提出了PI3Kδ抑制作为皮肤cGVHD的一种新型治疗策略。我们在多种cGVHD动物模型中验证其疗效。结果显示，PI3Kδ抑制显著降低了cGVHD皮肤评分，阻止了脱毛，减少了细胞浸润、胶原沉积和皮肤纤维化，并改善了总体生存期。从机制上讲，PI3Kδ抑制剂治疗改善皮肤缺氧微环境，减少Th2细胞产生IL-13，减少淋巴细胞簇在皮肤的浸润，从而抑制了缺氧上皮及巨噬细胞间互作导致的纤维化。在这项研究中，我们首次描述了cGVHD患者皮肤中的缺氧基因特征，并在小鼠模型中证实了这一病理生理过程。值得注意的是，PI3Kδ抑制剂通过逆转了皮肤缺氧微环境，改善了cGVHD的纤维化，这表明PI3Kδ抑制剂是针对皮肤cGVHD的一种有前途的治疗方法。 研究者说cGVHD 宋清晓教授 众所周知，cGVHD作为移植后最为常见的并发症之一，对移植患者的长期生活质量构成了严重威胁，因而一直是临床医生高度关注的焦点。cGVHD的病理过程复杂，涉及持续的慢性炎症与纤维化反应。当疾病进展至终末期的纤维化阶段时，单纯依赖抗炎治疗往往难以有效逆转其病理改变。因此，从治疗角度来看，临床医生面临着一项重大挑战：如何有效预防和逆转cGVHD的纤维化进程。 当前，糖皮质激素仍然是cGVHD一线治疗的首选药物。然而，遗憾的是，约有半数患者对激素治疗的反应并不理想，需要寻求二线治疗方案。尽管目前二线治疗尚未形成统一的标准方案，但已涌现出多种针对不同免疫细胞（如T细胞、B细胞、巨噬细胞）的靶向抑制治疗药物，如JAK抑制剂、ROCK2抑制剂、BTK抑制剂以及CSF1R抑制剂等。在本次ASH会议上，我们见证了多项关于这些二线治疗药物研究进展的精彩报告。 在临床实践中，一线治疗通常采用糖皮质激素，而二线治疗则可能是在糖皮质激素的基础上联合应用其他靶向药物，具体药物的选择需根据临床医生的综合判断与患者的具体情况而定。然而，cGVHD的复杂性在于其可累及多个器官，并表现出器官特异性的病理特征。因此，针对不同器官受累的患者，如何精准选择治疗靶点成为治疗cGVHD的关键所在。 为解决这一关键问题，我们团队致力于cGVHD的临床研究，特别是针对组织微环境免疫稳态失衡与器官特异性cGVHD发病机制的深入探索，希望通过这些研究，能够发现新的潜在治疗靶点，从而进一步优化个体化及精准治疗策略，为患者带来更为有效的治疗方案。 值得注意的是，不同器官特异性的cGVHD可能存在着不同的发病机制。鉴于此，在治疗策略的制定上，必须充分考虑受累器官的差异，精准选取相应的治疗靶点。O263这项研究就是针对皮肤cGVHD的一项基础且偏向临床转化的研究，结合了临床前的多个小鼠模型以及cGVHD患者皮肤活检的样本，对皮肤cGVHD的发病机制进行了深入的研究。 本研究的亮点在于，我们首次提出了在皮肤cGVHD发生时，皮肤处于缺氧微环境的状态。这种缺氧微环境有助于皮肤内浸润的免疫细胞的PI3K/AKT信号通路活化，促使T细胞在皮肤内向辅助性T细胞2（Th2）病理性表型转化，并促进其分泌IL-13。IL-13分泌的增多则进一步加剧了微环境的缺氧。同时，在缺氧微环境中，巨噬细胞更倾向于向促炎和促纤维化表型转换。因此，T细胞、巨噬细胞和缺氧微环境之间复杂的相互作用过程，共同推动了皮肤cGVHD纤维化的形成，且这一过程难以逆转。 本研究发现了HIF1α-PI3Kδ-IL-13这一轴在调控皮肤cGVHD纤维化病理生理发生中的重要作用。靶向这条通路中的关键分子，如HIF1α、PI3Kδ或IL-13，在临床前动物模型中均观察到了良好的预防和逆转纤维化的效果。目前，美国食品药品监督管理局（FDA）已经批准PI3Kδ抑制剂用于淋巴瘤的治疗，有理由相信，本研究成果有望为PI3Kδ抑制剂在皮肤cGVHD纤维化治疗方面，开辟新的应用前景，并推动其临床转化的进程。 ASH亮点之cGVHD 宋清晓教授 在本次ASH会议上，关于cGVHD的研究进展颇丰，其中两项研究尤为引人注目。 首先，移植后环磷酰胺（PTCy）的应用在cGVHD的防治方面展现出了卓越的效果。据报道，PTCy在移植后短期内使用，可选择性清除异体反应性T细胞，同时保留调节性T细胞的完整性，从而显著降低了cGVHD的发生率。值得注意的是，即使在高危患者群体中，PTCy也能将cGVHD的发生率降至历史最低水平。这一成果不仅极大地改善了患者的生存质量，还减少了移植后对免疫抑制剂使用的依赖，无疑是在cGVHD防治领域的一项重要突破。 此外，有关体外光疗（ECP）作用机制的新见解得到了展示。ECP的原理是将血液中的白细胞在体外进行紫外线照射，从而使T细胞失去活性。研究表明，经过杀伤的T细胞会被巨噬细胞吞噬，而巨噬细胞随后会使未经紫外线处理的T细胞失活，从而有效减轻炎症反应。目前，一些研究已经展示了ECP在cGVHD治疗中的良好效果。尽管还需要更大样本量的临床研究来进一步验证其疗效，但ECP无疑为我们提供了一种全新的治疗思路，为cGVHD的防控和治疗带来了新的希望。 宋清晓教授团队壁报展示 口腔慢性移植物抗宿主病中组织驻留双阴性T细胞介导唾液腺损伤 【获奖摘要】P3391 Tissue-Resident Double Negative T Cells Mediate Salivary Gland Damage in Chronic Oral Graft-Versus-Host Disease 【滑动查看研究内容】 慢性移植物抗宿主病（cGVHD）是同种异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后最重要的长期并发症，cGVHD患者口腔常受影响，大多数都会出现口干症，严重降低了患者的生活质量。cGVHD中唾液腺损伤的表现与经典干燥综合征相似，但其发病机制尚不清楚。 本研究检查了cGVHD患者唾液腺的病理特征，发现了导管周围浸润、腺体萎缩和纤维化。在三个小鼠cGVHD模型——主要组织相容性复合体（MHC）不匹配模型、单倍体造血干细胞移植（haplo-HSCT）模型和次要组织相容性抗原（miHA）不匹配GVHD模型中，免疫细胞浸润主要由CD8+ T细胞和双阴性T细胞（DNTs）组成。值得注意的是，这些DNTs表达各种细胞毒性分子（如杀伤细胞凝集素样受体G1、颗粒酶B）和炎性细胞因子。此外，与CD8+ T细胞相比，DNTs中糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白（GITR）、C-X-C趋化因子受体6（CXCR6）、程序性死亡受体-1（PD-1）和T细胞免疫球蛋白和黏蛋白域-3（TIM-3）的水平更高，这表明其具有效应记忆T细胞（TEM）/终末效应记忆T细胞（TEMRA）样表型，在cGVHD病变形成中发挥致病作用。主要MHC不匹配模型中的DNTs表现出Th1/Tc1特征，干扰素-γ（IFN-γ）和T-bet表达增加，而haplo-HSCT模型中的DNTs则表现出Th17/Tc17特征，白细胞介素-17（IL-17）表达更高。 研究发现，唾液腺中DNTs的发育不依赖于胸腺。小鼠中的谱系追踪、单细胞RNA测序和TCR-CDR3测序显示，GITR+ DNTs有可能起源于Tcf-1+CD8+ T细胞前体。此外，唾液腺上皮细胞表达的GITR配体（GITRL）对这些细胞毒性DNTs具有吸引作用，从而导致腺体损伤。 本研究结果表明，唾液腺上皮细胞与供体来源的DNTs之间的相互作用是口腔cGVHD中唾液腺损伤发病机制的核心。综上所述，针对GITR/GITRL信号通路的治疗策略有望成为解决口腔cGVHD中唾液腺功能障碍的潜在方法。这一发现为饱受此病折磨的患者带来了更具体、更有效的治疗新途径。 EZH2抑制通过调节中性粒细胞脂质代谢重编程和衰老来减轻慢性移植物抗宿主病 PP4777  EZH2 Inhibition Alleviates Chronic Graft-Versus-Host Disease By Modulating Lipid Metabolic Reprogramming and Senescence of Neutrophils 【滑动查看研究内容】 zeste增强子同源物2（EZH2）介导的组蛋白H3第27位赖氨酸三甲基化修饰（H3K27me3）在免疫调节中起着关键作用。先前的研究表明，EZH2抑制剂通过影响T/B细胞互作减轻慢性移植物抗宿主病（cGvHD）。然而，EZH2在cGvHD进展过程中对中性粒细胞的影响在很大程度上仍属未知。本研究旨在探讨EZH2抑制（EZH2i）在临床前慢性移植物抗宿主病模型中对中性粒细胞功能的影响。 研究组利用次要组织相容性抗原（miHA）不匹配的cGVHD（B10D2至BALB/c）模型，发现EZH2i可有效缓解cGVHD。组织病理学分析，包括H&E染色和马松三色染色，显示EZH2i治疗后皮肤和肺中的免疫球蛋白G（IgG）沉积和纤维化减少。流式细胞术分析表明，EZH2i抑制传统T细胞（Tcon）、浆细胞样B细胞和中性粒细胞浸润，同时扩增皮肤和肺中的调节性T细胞（Treg）。单细胞转录组测序鉴定出cGVHD肺组织中的五个不同的中性粒细胞亚群（Neu1-Neu5）。Neu1富含颗粒相关基因（如Retnlg、Mmp8、S100a8、Ngp、Lcn2和Ly6g），代表成熟中性粒细胞；Neu2具有与不成熟中性粒细胞和髓源性抑制细胞（PMN-MDSC）相关的基因；Neu3由具有干扰素刺激基因的经典成熟中性粒细胞组成，包括Ifit3和Isg15；Neu4显示趋化因子和炎症相关基因表达增加，表明其激活状态；Neu5与吞噬活性相关。轨迹分析表明，中性粒细胞从Neu1发展到Neu2，然后到Neu3、Neu4，最终到Neu5。激活的中性粒细胞（Neu4）和吞噬性中性粒细胞（Neu5）显示出最高的衰老评分，并上调了中性粒细胞激活期间也增强的多种途径，包括整合素和白细胞粘附、Toll样受体（TLR）、NOD样受体（NLR）和核因子κB（NF-κB）信号通路。 代谢谱分析表明，来自cGVHD受累肺部的中性粒细胞上调了参与脂质代谢的基因，如胆固醇生物合成和细胞脂质分解代谢过程。在机制上，我们发现EZH2介导的H3K27Me3抑制了过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（PGC1α）在中性粒细胞中的表达。因此，cGVHD中肺部浸润的中性粒细胞膜脂肪酸转运蛋白CD36和脂肪酸氧化（FAO）的限速酶肉碱棕榈酰转移酶1A（CPT1A）水平较低。这种FAO缺陷与它们的衰老表型相关；衰老的中性粒细胞产生更多的活性氧（ROS）。相比之下，EZH2抑制增强了CD36和CPT1A的表达，促进了向FAO的代谢转变，并逆转了中性粒细胞的衰老。这种代谢重编程减少了ROS的产生。此外，向FAO的转变还促进了Treg的生成，从而减轻了cGVHD。 综上所述，EZH2抑制剂通过减轻中性粒细胞的炎性衰老来减轻cGVHD。本研究提供了关于靶向抑制EZH2后中性粒细胞成熟、衰老和功能可塑性的新见解，并强调了调节表观遗传途径在cGVHD治疗中的治疗潜力。 宋清晓 教授 陆军军医大学第二附属医院（新桥医院）血液病医学中心 陆军军医大学第二附属医院（新桥医院）血液病医学中心、研究员 重庆市医师协会血液科医师分会委员 美国血液学协会会员 Blood & Genomics杂志编委 主要研究方向为造血干细胞移植的基础及临床转化研究 获“新重庆引才计划创新基地专项” 主持国自然青年基金一项，重庆市创新发展联合基金一项，重庆市科卫联合重点项目一项，研究的主要成果发表在Blood、Journal of Clinical Investigation、Nature Communications、PNAS、American Journal of Transplantation等本领域权威期刊上，其中第一作者7篇，通讯作者2篇。 （来源：《肿瘤瞭望–血液时讯》编辑部） 声 明 凡署名原创的文章版权属《肿瘤瞭望》所有，欢迎分享、转载。本文仅供医疗卫生专业人士了解最新医药资讯参考使用，不代表本平台观点。该等信息不能以任何方式取代专业的医疗指导，也不应被视为诊疗建议，如果该信息被用于资讯以外的目的，本站及作者不承担相关责任。

8 November 2024 New Release BioPorto Sponsors Exhibits to Showcase Launch of ProNephro AKI in the U.S. and Ongoing Marketing of The NGAL Test to Clinicians at Major Healthcare Conferences COPENHAGEN, DENMARK and BOSTON, MA, USA, November 8, 2024 – BioPorto Diagnostics, a pioneering company in the field of diagnostic biomarkers, today announced that the Company has sponsored exhibits at the following clinical healthcare conferences via invitation from conference organizers: 10th World Academic Congress of Emergency Medicine (WACEM 24), Rome, Italy (November 6th to 8th, 2024) 22nd Annual California Association of Neonatologists Annual Academic Day, Irvine, CA, (November 7, 2024) PICNIC: “Pediatric Intensive, Cardiac, and Neonatal Intensive Care Collaborative Conference”, New York, New York (November 8, 2024) Jennifer Zonderman SVP, Global Marketing and US Commercialization, commented, “We are thrilled to have been actively invited to engage with this important global community of emergency medicine clinicians, pediatric intensivists and nephrologist and neonatologists as we move forward with the U.S. launch of ProNephro AKI and the continued marketing of The NGAL Test where the CE mark of approval is accepted within EMEA and the APAC region. Our portfolio of biomarker-based Acute Kidney Injury (AKI) tests can have an immediate clinical impact on clinician assessment and patient outcomes as clinicians can discriminate AKI etiology and assess severity allowing for earlier initiation of therapies to improve patient outcomes.” About the Conferences 10th World Academic Congress of Emergency Medicine (WACEM 24), Rome, Italy (November 6th to 8th, 2024) WACEM2024 represents a global partnership focused on advancing patient cantered education, research and care across the world. The main objective of The World Academic Congress of Emergency Medicine 2024 is to advance emergency medicine, acute care, critical interventions and preventive medicine skills by supporting EM pioneers and leaders around the globe, by endorsing proper standards, providing training and education, as well as promoting proper access and services for all our emergency patients anywhere in the world. 22nd Annual California Association of Neonatologists Annual Academic Day, Irvine, CA, (November 7, 2024) The Annual Academic Day for Neonatology provides local, regional, and national Academic and Clinical Neonatologists, Neonatal-Perinatal Fellows, Critical Care Specialists, and Pediatricians with an update on new strategies for improving the health outcomes of neonatal babies. Target Audience: Clinical and academic neonatologists, neonatal fellows, OB/GYN's, MFM's, NICU nurses, and other allied healthcare professionals who care for neonatal patients are invited to attend. ​ PICNIC: “Pediatric Intensive, Cardiac, and Neonatal Intensive Care Collaborative Conference”, New York, New York (November 8, 2024) This in-person conference is designed to promote the importance of multidisciplinary collaboration and to understand the need for standardization or individualization, as appropriate, of key practice principles across neonatal, cardiac and pediatric intensive care units (ICUs). Identifying AKI Days Earlier ProNephro AKI and The NGAL Test quantify levels of neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) in human urine, EDTA and heparin plasma. NGAL measurements are useful in the risk stratification and diagnosis of acute kidney injury which may lead to renal failure. Confidently take action to manage fluid levels, avoid nephrotoxic agents, and potentially prevent permanent kidney damage. Identifying Acute Kidney Injury (AKI) early is difficult because the current standard of care relies on changes in serum creatinine and urine output, physiologic endpoints that are delayed, non-specific, and impacted by extrarenal factors such as nutrition status and muscle mass. To subscribe to news from BioPorto, please sign up at https://bioporto.com/investor-contact/ For product information, please sign up at https://bioporto.com/schedule-a-meeting/ For further information Jennifer Zonderman, BioPorto, +1 617 694 2918, jmz@bioporto.com Tim Eriksen, +45 4529 0000, investor@bioporto.com Ashley Robertson, LifeSci Advisors, +1-617-430-7577, arr@lifesciadvisors.com About Acute Kidney Injury Acute kidney injury is a sudden episode of kidney failure or kidney damage that happens within a few hours or a few days. AKI causes a build-up of waste products in blood and makes it difficult for kidneys to maintain the proper balance of bodily fluids. AKI can also affect other organs such as the brain, heart, and lungs and is common in patients who are in hospital intensive care units. For more information about AKI please visit: https://bioporto.com/aki/. About BioPorto BioPorto is an in vitro diagnostics company focused on saving lives and improving the quality of life with actionable biomarkers – tools designed to help clinicians make changes in patient management. The Company uses its expertise in antibodies and assay development, as well as its platform for assay development, to create a pipeline of novel and compelling products that focus on conditions where there is significant unmet medical need, and where the Company’s tests can help improve clinical and economic outcomes for patients, providers, and the healthcare ecosystem. The Company’s flagship products are based on the NGAL biomarker and designed to aid in the risk assessment and diagnosis of Acute Kidney Injury, a common clinical syndrome that can have severe consequences, including significant morbidity and mortality, if not identified and treated early. With the aid of NGAL levels which rise in relation to kidney injury, physicians can identify patients potentially at risk of AKI more rapidly than is possible with current standard of care measurements, enabling earlier intervention and more tailored patient management strategies. The Company markets NGAL tests under applicable registrations including CE mark in several countries worldwide. BioPorto has facilities in Copenhagen, Denmark and Boston, MA, USA. The shares of BioPorto A/S are listed on the Nasdaq Copenhagen stock exchange. For more information visit http://www.bioporto.com.