c-Rel

摘要:结核病（TB）是由基因密切相关的结核分枝杆菌复合群（MTBC）中的分枝杆菌引起的全球流行传染病。一个世纪以来，卡介苗（BCG）疫苗一直是预防结核病的主要措施。尽管它在有效预防儿童肺外结核方面效果显著，但在为成人提供肺结核保护方面缺乏一致的效力。因此，探索和开发能够为人群提供广泛保护的新型结核病疫苗，一直是医学研究中的一个重要领域。本文提供了目前正在进行临床试验的新型结核病疫苗的简要概述，讨论了它们的分类、保护效力、免疫原性、优点和局限性。在疫苗开发中，精心选择能够诱导强烈且多样化特定免疫反应的抗原至关重要。因此，我们总结了结核病疫苗所选抗原的分子特征、生物学功能、免疫原性以及相关研究。从疫苗和免疫原性蛋白中获得的这些见解将为新型分枝杆菌疫苗的开发提供信息，特别是mRNA疫苗，以有效控制结核病。 1.引言 结核病（TB）是由结核分枝杆菌复合群（MTBC）引起的一种传染性空气传播疾病。尽管它们的核苷酸序列高度相似（99.9%的相似性），但MTBC中的菌株根据宿主偏好和分子系统发育被分为不同的物种。全球人类结核病最常见的原因是结核分枝杆菌（M. tuberculosis 或 Mtb），其次是M. africanum，它在西非的病例中约占一半。此外，一些适应动物的物种，如M. bovis，可以感染广泛的宿主，导致人畜共患结核病，这对全球人类和兽医公共卫生构成了重大挑战。尽管治疗取得了进展，结核病仍然是最致命的传染病之一。根据世界卫生组织（WHO）的数据，2021年全球估计有1060万人感染了结核病，导致160万人死亡。目前，全球约四分之一的人口携带潜伏性结核感染（LTBI），虽然大多数人无症状，但大约5%-10%的人在一生中会发展成活动性结核病。2015年，WHO启动了结束结核病战略，旨在到2030年实现结核病发病率减少80%和结核病相关死亡率减少90%。然而，耐多药（MDR）菌株的全球传播，以及由人类免疫缺陷病毒（HIV）和2型糖尿病引起的并发症，增加了感染风险。此外，Mtb感染是HIV-1感染者死亡的主要原因。结核病和HIV-1共感染可以破坏宿主免疫系统，特别是通过损害CD4+ T细胞和巨噬细胞。开发创新的诊断方法、药物和疫苗对于有效应对这些挑战至关重要。疫苗接种被认为是实现全球结核病发病率和死亡率年度减少的最经济有效的策略之一。卡介苗（BCG）疫苗，目前唯一获得许可用于人类的结核病疫苗，为儿童提供了长期且强大的保护，预防粟粒性和脑膜炎结核病。然而，其在预防成人肺结核方面的有效性有限。由于Mtb的复杂基因组和结构，选择有效且安全的抗原一直是疫苗设计中的首要考虑因素。由于免疫学和分子生物学的进步，结核病疫苗开发取得了实质性进展。到2022年，有十六种疫苗候选处于不同的临床试验阶段，包括全细胞细菌疫苗、亚单位疫苗和mRNA疫苗。这些疫苗中使用的抗原涉及多种分枝杆菌菌株和十多种Mtb的结构或分泌蛋白，这些在实验室和临床实验中产生了不同的评估结果。本综述提供了传统和新型结核病疫苗的概述。此外，它还全面总结了结核病疫苗开发中选择的抗原在基础或临床研究中的发现，为开创性疫苗设计提供了宝贵的指导和策略。 2.全细胞细菌疫苗 全细胞细菌疫苗包括减毒、灭活和重组变体。卡介苗，源自减毒的M. bovis，被广泛使用，并对全球健康产生了重大影响。与亚单位疫苗相比，含有复杂抗原的全细菌疫苗可能潜在地诱导更多样化的免疫反应。卡介苗用于婴儿和幼儿，提供了80%的保护效力。然而，普遍接受卡介苗疫苗预防成人肺结核仍有待讨论。这表明卡介苗菌株可能与Mtb有不同的病理机制，可能导致免疫反应不足。实际上，在多年的连续传代过程中，卡介苗菌株经历了遗传变化，并失去了差异区域1（RD1）中的九个基因，这些基因已知对毒力很重要。卡介苗疫苗被发现可以预防播散性结核病，并降低全因死亡率。此外，它还可以提供一定程度的保护，防止由不相关病原体如疱疹和流感病毒引起的感染。这种广泛的保护被认为是通过触发先天免疫记忆和刺激异种淋巴细胞激活来实现的，这导致细胞因子分泌增加，巨噬细胞功能增强，T细胞反应改善，抗体水平提高。卡介苗疫苗在婴儿中触发的非特异性“训练免疫”可能比成人更有效，成人可能之前已经接触过非结核分枝杆菌（NTM）和其他病原体。为了解决卡介苗疫苗的局限性并增强其特异性，目前正在临床试验中研究几种新的全细胞细菌疫苗或疫苗接种策略。这些包括对BCG重新接种的研究，以及评估DAR-901（灭活M. obuense）、RUTI（Mtb细胞片段）、MIP（灭活M. indicus pranii）、MTBVAC（减毒M. tuberculosis）和VPM1002（重组BCG）等疫苗的IIb期和III期。 DAR-901是灭活的M. obuense，一种快速生长的分枝杆菌（RGM）的环境色素分枝杆菌。临床前研究表明，DAR-901可以诱导细胞和体液免疫，增强对Mtb的保护。然而，在坦桑尼亚进行的临床试验表明，观察到的效果可能在预防健康青少年结核病感染方面不显著。 RUTI®是一种由灭活的Mtb细胞片段制成的脂质体治疗疫苗。它可以诱导细胞免疫和体液免疫，特别是触发针对Mtb多种抗原的Th1反应。临床研究表明，RUTI安全且耐受性良好，最常见的不良反应是轻度至中度的注射部位反应。 MIP指的是灭活的M. indicus pranii，一种非致病性RGM。在一项随机、双盲、多中心临床试验中，MIP被证明是安全的，没有报告不良反应。此外，与安慰剂组（57%）相比，MIP组（67.1%）的患者在第四周实现痰培养转化的比例更高，表明MIP在清除Mtb方面可能发挥作用。 MTBVAC是设计了phoP和fadD26基因缺失的Mtb菌株的减毒疫苗，在洛桑进行的临床试验中显示出与卡介苗相当的安全性和免疫原性。MTBVAC是唯一一种减毒疫苗，包含所有Mtb的主要免疫优势抗原，如ESAT6和CFP10。 VPM1002是基于重组卡介苗的活疫苗，已在南非的新生儿中进行了临床试验，显示出安全性和比卡介苗更低的反应原性。然而，VPM1002的免疫原性被发现低于卡介苗疫苗。 Vaccae™是从非感染性结核分枝杆菌衍生的灭活疫苗，通过热灭活和高压空气剪切实现。Vaccae™已完成III期临床试验作为预防性结核病疫苗，疫苗可以诱导细胞免疫并减轻过敏炎症反应。此外，临床研究表明，使用Vaccae™作为辅助免疫疗法，显著提高了痰涂片阴性转化率（68%），促进了病变改善和空洞闭合，缩短了治疗时间，并减轻了化疗相关损伤。作为预防性疫苗，Vaccae™可以有效抑制Mtb的增殖和激活，阻碍LTBI的进展，并降低感染率。 鉴于它们与卡介苗相当的安全性和有效性，这些新型全细胞细菌疫苗有可能成为更好的替代品。特别是，应该注意到，减毒疫苗可能不适合免疫缺陷或HIV感染的个体，因为他们有更高的结核病进展风险。在这种情况下，开发灭活分枝杆菌和亚单位疫苗对于这一人群更为紧迫和合适。 3.亚单位疫苗 3.1 病毒载体疫苗 亚单位疫苗包括病毒载体疫苗和佐剂蛋白亚单位疫苗。与传统的灭活和减毒疫苗不同，这些疫苗使用整个病原体作为抗原，亚单位疫苗包含或表达特定的病原体蛋白，这降低了接种个体生病的可能性。目前，两种病毒载体疫苗（Ad5Ag85A 和 TB/FLU-04L）处于I期，而另一种（ChAdOx185A-MVA85A）处于IIa期。Ad5Ag85A 和 ChAdOx185A-MVA85A 疫苗分别基于人5型腺病毒（Ad5）和猴腺病毒。而TB/FLU-04L是一种活的重组流感A病毒疫苗。这些疫苗表达Mtb蛋白Ag85A，TB/FLU-04L也表达抗原ESAT-6。临床试验结果表明，ChAdOx185A-MVA85A疫苗诱导了特定的CD4+和CD8+ T细胞免疫反应，产生了IgG抗体，并且没有严重的不良反应。此外，TB/FLU-04L疫苗被发现是安全的，并且能够引发针对Mtb的特定Th1免疫反应。另一项研究表明，Ad5Ag85A肌肉注射疫苗是安全的，具有免疫原性，并刺激了多能T细胞反应，特别是在之前接种过BCG疫苗的个体中。病毒载体疫苗在生产效率和成本效益方面具有优势。与传统的灭活疫苗相比，它们能够通过诱导强烈且持久的免疫反应来提供持久的免疫力。然而，评估病毒载体疫苗的安全性和有效性时，必须考虑某些限制。一个担忧是，针对载体的预先存在的免疫力是否会影响其效力。研究表明，之前接触过流感病毒可能会影响对目标抗原的反应。腺病毒疫苗也面临类似的挑战，因为在接种个体中对Ad5的中和抗体水平升高已经显示出抑制重组腺病毒疫苗的免疫原性，特别是在Ad5抗体滴度高的地区。此外，存在与流通的野生型病毒发生遗传重组的风险，可能导致抗原基因的丢失和毒力的恢复。 3.2 佐剂蛋白亚单位疫苗 除了病毒载体疫苗外，目前有五种蛋白亚单位疫苗正在进行临床试验。这些包括ID93 + GLA-SE（QTP101）和AEC/BC02处于IIa期，H56: IC31和M72/AS01E处于IIb期，以及GamTBvac处于III期。 ID93 + GLA-SE是一种重组融合蛋白，由四种Mtb抗原（Rv1813c、Rv2608、Rv3619c和Rv3620c）与含有TLR4L的佐剂（GLA-SE）结合而成。I期临床试验表明，其安全性和有效性，能够诱导强烈的抗原特异性血清抗体和Th1型细胞免疫反应。 AEC/BC02包含Ag85B抗原和EC融合蛋白（ESAT6-CFP10），以及由未甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（CpG）DNA片段和铝盐衍生的佐剂BC02。虽然作为一种预防性疫苗效果不佳，但在LTBI的临床前模型中显示出作为免疫治疗对抗进展性疾病的潜力。 H56: IC31结合了三种Mtb抗原（Ag85B、ESAT-6和Rv2660c）和IC31佐剂。在动物上进行的研究表明，H56: IC31增强有潜力控制晚期Mtb感染并限制潜伏性结核病。尽管在I期试验中一些受试者观察到短暂的心血管不良事件，但疫苗诱导的抗原特异性IgG反应和表达Th1细胞因子的CD4+ T细胞。 M72/AS01E是由两种Mtb抗原Mtb32a（PepA）和Mtb39a（PPE18）组成的重组融合蛋白，带有基于脂质体的AS01佐剂系统。在感染的成年人中，它显示出54.0%的保护效果，防止活动性肺结核病，没有显著的安全问题。 GamTBvac包括两种分枝杆菌融合蛋白，Ag85A和ESAT6-CFP10，它们固定在右旋糖酐上。该疫苗还包含一种由DEAE-右旋糖酐核心以及TLR9激动剂组成的佐剂，即CpG寡脱氧核苷酸。它在小鼠和豚鼠结核模型中显示出强大的免疫原性和对Mtb H37Rv菌株的显著保护效果。II期研究表明，它能够在健康成年人中诱导抗原特异性IFN-γ释放和表达Th1细胞因子的CD4+ T细胞。 结核病亚单位疫苗提供了几个优势特点，包括低成本、易于准备和安全性。一些疫苗是非常有希望的LTBI潜在治疗方法。重要的是收集更多数据并进行研究，以更好地了解这些结核病亚单位疫苗的长期有效性和安全性，特别是在像HIV这样的合并症人群中。正在进行的研究将为这些疫苗在临床实践中的潜在使用提供宝贵的见解。 4.mRNA疫苗 信使RNA（mRNA）疫苗已成为一种新型疫苗类别，近年来在COVID-19 mRNA疫苗的开发和授权中获得了显著的关注和成功。由于它们在疫苗设计上的灵活性、生产时间短、成本效益以及激发细胞和体液免疫反应的能力，mRNA疫苗已成为抗击传染病的主要候选疫苗之一。mRNA疫苗的设计取决于仔细的抗原选择。理想的目标抗原应该是免疫原性的，并且能够激发保护性免疫反应，确保疫苗有效地产生针对特定病原体所需的免疫反应。然而，mRNA疫苗的热稳定性可能存在挑战，特别是在获得可靠冷藏系统的途径有限的地区。mRNA是脆弱的，如果不在适当的温度下储存和运输，容易降解，需要冷链储存和分发。 通过开发具有改进热稳定性的mRNA疫苗来克服这一限制，将增强它们在资源受限地区的可行性和可访问性。目前，唯一的一种结核病mRNA疫苗，BNT164，正在进行I期临床试验，以确定在三剂计划中的安全和耐受剂量。没有公开的报告可用，关于BNT164在预防结核病方面的保护效果、免疫原性和安全性。需要进一步的研究来验证mRNA疫苗是否可以激发针对结核病更强大和更全面的免疫反应。 5.结核病疫苗的抗原选择 如前所述，分枝杆菌的抗原在结核病亚单位和mRNA疫苗的开发中得到广泛使用（表1）。这些抗原包括结构蛋白、与毒力相关的蛋白以及细菌表面存在的免疫调节因子或分泌的蛋白。本综述部分深入探讨了特定基因及其编码的细胞组分，为未来的抗原选择和疫苗设计提供了有价值的见解。 表1:结核病亚单位疫苗的免疫原性蛋白。 5.1. fbpA（mpt44, Rv3804c; Ag85A） 纤连蛋白结合蛋白（Fbps），也称为抗原85复合物，包括FbpA、FbpB和FbpC，位于结核分枝杆菌（Mtb）的细胞壁中，并具有分泌能力。所有的Fbps都包含一个羧酸酯酶结构域，每种蛋白都作为酰基转移酶参与分枝杆菌细胞壁的形成。抗原85复合物在促进6,60-二酰基（TDM）的生物合成和维持Mtb细胞壁结构稳定性方面发挥关键作用。研究表明，FbpA表达的缺失抑制了Mtb在人和小鼠类巨噬细胞系中的复制，表明FbpA可能在致病机制中发挥作用。分泌的抗原85蛋白具有高度免疫原性，并持续由细菌表达，对刺激B细胞和T细胞反应至关重要。特别是T细胞，可以通过释放细胞因子和激活各种免疫细胞（如巨噬细胞、自然杀伤（NK）细胞、树突状细胞（DC）和细胞毒性T（Tc）细胞）来激活细胞和体液免疫系统。这种协调的免疫反应有助于破坏细胞内Mtb感染。在目前处于临床试验阶段的疫苗中，AEC/BC02、GamTBvac、Ad5Ag85A、TB/FLU-01/4L和ChadOx185A使用Ag85A作为抗原成分。 5.2. fbpB（mpt59, Rv1886c; Ag85B） FbpB是一种分泌蛋白，负责细菌细胞包膜的生物合成。Fbps在氨基酸水平上具有高度的相似性，有68-80%的一致性。这表明这三种酶可能都参与了细胞壁的酰基化，与FbpA和FbpB相比，FbpC可能发挥更关键的作用。由于它们的酶活性和作为分泌蛋白的状态，Fbps不仅作为潜在的药物靶点相关，而且作为诊断抗原。定量分析包括Fbps在内的分泌细菌蛋白的水平，可以提供有关Mtb生长阶段的见解。目前，只有一种疫苗H56:1C31使用Ag85B作为抗原。 5.3. PPE18（mtb39a, Rv1196） PPE18是PPE家族的成员，其特点是包含一个带有脯氨酸-脯氨酸-谷氨酸（PPE）基序的保守N端结构域。这些蛋白被认为参与了抗原变异和疾病致病机制。蛋白质组学结果鉴定了8种PE和PPE家族蛋白是Mtb培养滤液蛋白（CFP），包括PPE18以低丰度存在，这表明其可能被分泌。然而，另一项研究发现PPE18在Mtb的裂解物中但不在CFP中，表明它可能不是分泌抗原。额外的研究表明PPE18与Mtb的细胞壁相关并暴露在细胞表面。有建议称PPE18可以通过与巨噬细胞中的TLR2相互作用触发抗炎反应，从而产生白细胞介素-10（IL-10）。在先天免疫反应中，巨噬细胞分泌的细胞因子IL-12和TNF-α在促进Th1 T细胞的发展和增强细胞介导的免疫反应中发挥关键作用。这些免疫反应对于对抗细胞内感染，如结核病至关重要。然而，PPE18已证明能够在LPS刺激下抑制巨噬细胞中促炎细胞因子的产生。这是通过上调抑制因子3（SOCS3）的表达和酪氨酸磷酸化，随后抑制转录因子p50、p65和c-rel的核转移来实现的。此外，PPE18有能力阻碍巨噬细胞通过MHC II类介导的抗原呈递。这导致CD4+ T细胞的激活受损，随后影响B细胞的反应。总的来说，这些发现表明PPE18作为免疫抑制因子，并且在Mtb的免疫逃逸中发挥关键作用。疫苗M72/AS01E选择了PPE18作为抗原之一。 5.4. PPE42（Rv2608） PPE42是Mtb PPE蛋白家族的成员。PPE42作为强效的B细胞抗原，能够诱导强大的体液免疫反应，同时引发相对较低水平的T细胞反应。PPE42是ID93+GLA-SE/QTP101疫苗的抗原。 5.5. pepA（mtb32a, Rv0125） PepA是一种假定的丝氨酸蛋白酶，功能未知，被认为是一种分泌蛋白。它有能力促进外周血单核细胞（PBMC）的增殖并诱导IFN-γ的分泌。PepA在不同分枝杆菌物种中的高保守性表明其作为有希望的疫苗靶点的潜力。PepA在M72/AS01E疫苗中与PPE18融合。 5.6. esxA (esat-6, Rv3875) EsxA，也被称为早期分泌性抗原靶标6千道尔顿（ESAT-6）。它属于WXG100家族，该家族由大约23个蛋白质组成，这些蛋白质大小约为100个氨基酸。这个家族中的蛋白质表现出螺旋结构，并显示出由保守的W-X-G基序产生的独特的发夹弯曲。这种蛋白质通过ESAT-6分泌系统1（ESX-1），也称为VII型分泌系统（T7S），被分泌出来。编码ESAT-6以及一个10千道尔顿培养滤液蛋白（CFP10）的基因位于RD1区域。如前所述，这个区域存在于所有有毒力的Mtb和M. bovis菌株中，但在卡介苗菌株中不存在。将ESAT-6和CPF10重新引入卡介苗菌株会导致菌落形态的显著变化以及宿主内毒力的增加。ESAT-6作为Mtb中的毒力因子发挥着至关重要的作用，通过几种机制帮助免疫逃逸。首先，ESAT-6阻碍宿主细胞中的抗原呈递过程。它与内质网中的宿主蛋白beta-2-微球蛋白（β2M）相互作用，隔离β2M，并抑制MHC-I-β2M复合物在细胞表面的展示，从而降低MHC-I介导的抗原呈递。其次，ESAT-6与Mtb的先天免疫反应减少有关。它通过阻碍Toll样受体（TLR）信号传导，抑制转录因子NF-κB和干扰素调节因子（IRFs）的激活。此外，ESAT-6直接以p38 MAPK依赖性方式抑制IFN-γ的产生和人T细胞的增殖。第三，ESAT-6可以调节宿主细胞死亡。它在中性粒细胞中诱导坏死，以及在THP-1人巨噬细胞中诱导凋亡。ESAT-6是一种强效抗原，能够触发T细胞免疫反应，并在结核感染的早期阶段被T细胞识别。此外，它可以刺激B细胞产生特异性抗体。因此，ESAT-6经常被用作诊断工具，并包含在疫苗配方中。AEC/BC02、H56:1C31、GamTBvac、TB/FLU-01/4L 4种疫苗选择ESAT6作为共同抗原。 5.7. esxB (cfp10, Rv3874) CFP10是另一种WXG100家族蛋白，可以与ESAT-6形成紧密的1:1复合物，并通过ESX-1分泌。磷酸化蛋白质组学和分泌体数据显示，CFP10在T49位点的磷酸化由Mtb丝氨酸/苏氨酸激酶PknA和PknB促进，形成CFP10同源二聚体的形成，同时抑制ESAT6的分泌。CFP10/ESAT6复合物可以与细胞表面受体相互作用，影响宿主细胞行为。已经显示它可以抑制或促进巨噬细胞中TNF-α的产生，从而调节巨噬细胞细胞死亡。此外，该复合物抑制RAW264.7细胞中活性氧物种（ROS）的产生，并降低LPS诱导的NF-κB激活。此外，CFP-10，而不是ESAT-6，特别在人中性粒细胞中触发Ca2+反应，可能有助于它们在Mtb感染期间的招募和激活。CFP10和ESAT-6都具有高度免疫原性，并与人类的毒力有关。值得注意的是，CFP10引发强烈的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应，这种反应被招募到肺部，在Mtb感染的小鼠中占肺部CD8+ T细胞的高达30%。这些发现为旨在引发CD8+ T细胞反应的疫苗策略提供了希望。AEC/BC02和GamTBvac疫苗选择EsxB作为抗原。 5.8. Rv1813c Rv1813c是一种分泌蛋白，其表达受Mtb的双组分信号系统（TCSS）调节。TCSS的DosR和MprA蛋白可以结合到Rv1813c的上游启动子，并在对缺氧、一氧化氮和一氧化碳的反应中增强其转录。Rv1813c靶向线粒体以操纵宿主代谢。在真核细胞中表达时，它被运输到线粒体的膜间空间，从而通过增强氧化磷酸化代谢途径来增加ATP产生。这反过来又影响感染Mtb的巨噬细胞的代谢和凋亡反应。作为保守的潜伏期抗原，Rv1813c是疫苗开发有希望的候选者。该蛋白能够被T细胞识别，并在小鼠中激活IFN-γ/TNF和TNF/IL-2细胞因子的表达，导致强烈的CD4+ T细胞反应。值得注意的是，与Rv3619c、Rv3620c和Rv2608相比，Rv1813c刺激了最多的IFN-γ和/或TNF阳性CD8+ T细胞。ID93+GLA-SE/QTP101选择Rv1813c作为抗原。 5.9. esxV (Rv3619c) 和 esxW (Rv3620c) Rv3619c和Rv3620c属于WXG100家族，并通过Mtb中的T7S排泄。与ESAT-6/CFP10类似，Rv3619c和Rv3620c相互作用形成1:1异二聚体复合物。Rv3619c和Rv3620c都可以诱导IFN-γ的产生和T细胞反应，表明它们是具有多个T细胞免疫原性表位的Mtb的良好疫苗候选者。Rv3619c和Rv3620c都是ID93+GLA-SE/QTP101疫苗中的抗原。 5.10. Rv2660c Rv2660是一种与潜伏期相关的蛋白质，其功能未知。研究表明，Rv2660可以在LTBI个体中诱导增加IFN-γ的产生，更多的活性T细胞数量，以及增强特定的CD4+ T细胞增殖。H56:1C31使用Rv2660c作为抗原。 6.结论和展望 结核病是人类历史上最古老且最致命的疾病之一，给健康、社会和经济带来了重大负担，特别是在低收入和中等收入国家。活动性肺结核患者可以通过咳嗽或打喷嚏将结核分枝杆菌散播到空气中。Mtb感染的主要靶点是肺泡巨噬细胞。如果不能及时清除，细菌在巨噬细胞内复制，然后感染其他细胞，引发强烈的免疫反应。中性粒细胞、淋巴细胞和其他免疫细胞迁移到感染部位，形成逐渐发展成特征性肉芽肿结构的细胞浸润，最终钙化。在这些肉芽肿中，Mtb可以保持休眠状态，非代谢活跃状态多年、几十年甚至一生。目前，全球有超过1亿人患有潜伏性结核感染（LTBI），这可能随时发展成高度传染性且可能致命的活动性结核病。 结核病的治疗主要依赖抗生素。然而，耐多药结核病（MDR-TB）的出现使得两种最有效的一线药物——异烟肼和利福平失效。替代的二线治疗方案需要大量昂贵且有毒的药物。此外，HIV-TB共感染的结核病管理变得更加具有挑战性。HIV阳性患者发展成活动性结核病的风险是未感染个体的26-31倍。HIV-TB共感染需要长期治疗，由于复杂的药物相互作用和不良反应，同时治疗两种疾病面临额外挑战。 在这种情况下，开发预防和治疗结核病的新型疫苗是紧迫和必要的。随着疫苗研究技术的进步，几种新的疫苗候选已经进行了临床试验。然而，目前的临床研究表明，这些新型疫苗在诱导免疫反应和清除病原体感染方面并未显示出比卡介苗（BCG）的显著优势。此外，这些疫苗在HIV患者和免疫功能低下个体中的有效性和安全性仍需评估。显然，在疫苗设计和抗原选择策略中存在值得注意的问题：（1）Mtb与宿主之间的相互作用，以及调节免疫系统的机制尚未完全理解。Mtb基因组由4.4 Mb组成，包含大约4000个基因，但大多数基因的功能仍然不清楚。研究与Mtb增殖、毒力和休眠相关的基因可能为疫苗设计或药物开发提供新目标。（2）开发预防性和治疗性结核病疫苗同等重要。一方面，我们需要开发卡介苗疫苗的替代品，以实现更持久和特定的保护。另一方面，需要针对活动性和潜伏性结核感染的治疗性疫苗，以消除体内的病原体并对抗耐药菌株。 （3）Mtb可以分泌多种抗原，作为免疫原性蛋白和毒力因子，参与调节宿主细胞死亡、抑制宿主免疫信号通路、调节宿主细胞抗原呈递和调节宿主细胞细胞因子产生等各种生理活动。修改这些抗原以增强其免疫原性并减少其副作用是需要解决的问题。 （4）目前的疫苗评估主要集中在辅助T细胞反应和IFN-γ分泌上，对体液免疫在抗击结核病感染方面的研究有限。考虑在疫苗抗原设计中纳入B细胞表位可能导致更平衡的细胞和体液免疫反应，可能产生更好的效果。 随着COVID-19大流行，mRNA疫苗的开发似乎已进入黄金时代。mRNA疫苗引入了一种新型疫苗，通过脂质纳米颗粒将编码病原体抗原的信使RNA传递到哺乳动物细胞中，引发强烈的细胞和体液免疫反应。mRNA疫苗提供了灵活性和适应性，只需要改变编码序列即可表达不同的抗原。多种mRNA疫苗可以共享相同的纯化方法和生产线，显著缩短开发周期。此外，mRNA疫苗在融合表达多种抗原方面具有优势。开发多价结核病疫苗以增强其免疫原性也是一个有希望的发展方向。如果mRNA疫苗能够解决生产成本、储存和运输稳定性方面的问题，它们在应用上可能具有更大的前景。 总之，新的研究理论和技术进步为疫苗开发注入了新的活力，敦促我们继续抗击结核病，进一步减少结核病给人类社会造成的损失。 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

BiG 2024秋季论坛现场掠影 自免领域，有一个传奇神药，来自艾伯维的修美乐（Humira®）连续11年登顶全球“药王”宝座，一路助推艾伯维。但从2023年开始，随着修美乐跌落专利悬崖，“后修美乐”时代，群雄并起。 寻找下一个自免神药，2024年10月12日，BiG联合深圳医学科学院、深圳湾实验室、卫光控股，走进深圳光明，成功召开秋季论坛。 10.11日，召开会前私董会活动，聚焦Biotech融资策略，及科学家创业及退出路径的探讨！此次会议采取小而美的闭门形式，仅限百席，吸引了众多国内外生物医药行业领袖，其中不乏新药研发第一批吃螃蟹的拓荒者。 第六届BiG新药辩论赛更是点燃全场，围绕科学家创业与商业模式，展开了十分激烈的辩论，让人意犹未尽！ * 以下内容为会后整理，观点未经所有分享嘉宾审核，仅供行业参考交流！亦不构成任何投资及用药建议。 10月12日自免研讨会、参观视频快闪   01   自免研讨会 研讨会主持 李   圆：BiG秘书长 联合主办方致辞 张  战：卫光控股董事长、卫光生物董事长 感谢BiG和生物医药行业各位大咖们、朋友们向光而行，走进光明！ 卫光控股和卫光生物都是我们光明区的区属国有企业，卫光生物是一个主板的上市公司，去年的营收超过了10亿元，利润2个多亿，它也是深圳最早的做生物医药的公司，成立于1985年，明年我们就是40年。卫光控股今年刚刚成立，是为生物医药产业发展而成立的一个平台化的公司。一老一新，一开一合的两个企业，组成在一起，实际上出现了一些新的化学反应和资源整合。一是资金，二是空间，今天会议召开地卫光生命科学园，是占地100亩，它的底蕴是一个完全的生物医药产业的底蕴，第三是产业基础，生产体系和质量体系，包括未来的市场营销，都是非常成熟和雄厚的。 联合主办方致辞 涂  欢：深圳医学科学院副院长、深圳湾实验室副主任 欢迎各位生物医药圈科学家、企业家和投资人朋友的到来！ 深圳医学科学院是市政府直属的新型科研机构，可能在全国都是一个很特别的存在，它有六大主要职能，致力建成集前沿科学研究、科技资源管理、教育与交流、临床研究网络、科技成果转化与政策咨询为一体的医学科技战略机构，打通生命健康领域原始创新与临床医学研究之间的“无形壁垒”。 深圳湾实验室，从2018年开始策划，带着一个梦想，希望能够在深圳打造一个能够让科研人员安心做科研，同时希望多学科交叉以及基础研究和转化研究一体的科研机构。以协同攻克生命健康重大科学难题为导向，以肿瘤、代谢与心血管、神经退行性、传染性等重大疾病的预防、诊断和治疗为焦点，以IT+BT融合及多学科交叉为特色。 深圳医学科学院+深圳湾实验室的联动，希望可以将基础研究、临床转化统一协调起来，能够为粤港澳大湾区、中国生物医药、以及为全球生命健康做出自己的贡献来。 Keynote—炎症免疫检查点与AI驱动药物研发 陈有海：美国医学与生物工程院士、欧洲科学院院士、深圳理工大学药学院院长 约10%的人口患有炎症性疾病，可影响全身各个器官，中国相关费用已超过1万亿元。常见炎症性疾病包括炎症性肠病、溃疡性肠炎、多发性硬化和类风湿关节炎等。 我们实验室对炎症领域两个新靶点展开了深入研究：TIPE蛋白和C-Rel蛋白。TIPE蛋白作为免疫细胞迁移的"指南针"，通过调控第二信使如PIP2和PIP3的分布来指导细胞迁移。阻断TIPE可减弱炎症反应，预防多发性硬化等自身免疫性疾病。C-REL蛋白是控制炎症因子表达的关键转录因子，抑制C-REL可有效预防和治疗多种炎症性疾病模型，包括多发性硬化、糖尿病和风湿性关节炎等。 尽管有多种药物被批准用于治疗自身免疫性炎症，大多数接受治疗的患者最终都会经历疾病进展。因此，急需对自身免疫性疾病更有效的疗法。通过靶向免疫检查点，有望开发出能控制大部分下游炎症因子的新型药物，从而实现更好的治疗效果。同时，AI技术的应用将加速这一过程，为生物医药行业带来新的重大机遇。 Keynote—临床视角，创新药开发自免，如何选择适应症？ 王晓冰：海军军医大学上海长征医院风湿免疫科副主任医师 自身免疫性疾病患病人群基数大且逐年递增。中国风湿免疫学科起步相对较晚，但近年来随着学科发展，自身免疫病日渐受到重视。以类风湿关节炎为例，其对患者生活质量和社会经济影响巨大，可导致患者在短期内丧失劳动能力。自身免疫性疾病治疗经历了四个里程碑式发展：从早期以药阿司匹林为代表的消炎止痛药物的面试到现代的生物制剂，以及最新的细胞生物治疗。 自身免疫病致病机理的解析是选择治疗靶点的依据，是转化医学的基础。徐沪济教授带领的上海长征医院风湿免疫科团队进行了大量遗传学和免疫学研究，包括强直性脊柱炎和类风湿性关节炎的GWAS研究，这些研究发现中国人群与欧美人群在某些靶点上存在差异；强直性脊柱炎的免疫炎症研究，揭示了免疫耐受机制在发病中的作用，对药物研发有重要指导意义。 本团队也开发了基于遗传学信息的早期诊断模型，提高了诊断的敏感性和特异性。对于强直性脊柱炎，该模型在中国人群中达到91%的敏感性和95%的特异性，远高于现行的ASAS标准（83%敏感性和84%特异性）。这一研究发表在风湿免疫领域顶级期刊ARD上。 CAR-T是自身免疫病的创新治疗之一！虽然中国是CAR-T临床试验的大国，但在自身免疫性疾病领域还面临诸多挑战。因为自体CAR-T细胞治疗存在以下方面的问题，使之在自身免疫性疾病领域应用受限： 1）质控问题：部分患者细胞制备困难 2）停药风险：自身免疫病患者停药可能导致病情复发 3）价格问题：治疗成本高（约100多万），患者接受度低 4）细胞功能：自身免疫病患者T细胞功能较差，增殖扩增能力仅为正常人的1/30到1/50 我们团队率先使用了基因编辑的异体通用型CAR-T细胞治疗难治性自身免疫病患者。我们的研究结果展示了优异的疗效，不仅实现了深度B细胞耗竭，还在监测期内表现出显著的临床改善，包括疾病评分、多个血清学、生理学和功能性指标的显著改善，且安全性表现令人满意。这项研究已发表在《细胞》杂志（Cell 2024；187：4890-4904），并被评论为“可能成为自身免疫性疾病的范式转变”（Cell 2024；198：4826-4828）。本研究展示了一种新型的、现成的、通用的同种异体CAR-T产品在治疗难治性SLE方面的巨大潜力，其具有理想的疗效和安全性，如果在临床上更广泛应用，可能会产生显著影响。尽管CAR-T治疗在自身免疫性疾病领域显示出巨大潜力，但仍需要更多探索和研究，以优化治疗策略，提高疗效，并降低成本。 MNC视角，AZ在肿瘤+自免的布局和开发策略 章   宇： 阿斯利康产品管线和项目管理副总裁 近10年来，中国制药工业发生翻天覆地的变化，从追赶欧美到同步开发，部分领域已走在全球前列。AZ 坚信中国创新将改变全球制药格局，上海也成为AZ全球第五个战略中心。 AZ研发布局五大重点领域：肿瘤、心血管/肾病/代谢、呼吸/免疫、疫苗和免疫疗法以及罕见病。其中肿瘤免疫仍是肿瘤治疗的重点，肿瘤相关产品占AZ管线的60%。肿瘤领域重点方向： 1）新型ADC和RC，以替代传统放化疗 2）下一代免疫治疗（IO） 3）细胞治疗和T-cell engagers 4）联合疗法：ADC，RC与下一代IO联合治疗 5）早期诊断 AZ在自身免疫领域也在不断突破，布局风湿疾病领域。首个突破性产品是干扰素类药物，anifrolumab将成为SLE的标准治疗，并逐步扩展到其它 1型IFN疾病。AZD0120-CD19/BCMA 双靶自体CAR-T 也有希望为SLE患者带来更有效和更持久的治疗选择。AZ将进一步加强自身研发能力，促进外部合作，持续发掘中国机遇，推动中国创新走向全球舞台。 Panel：自免创新药如何立项？MNC&biotech的布局策略，BD合作，不同modality开发自免优势及挑战，值得关注的新靶标 从左到右： 周潇薇：松禾资本董事总经理（主持） 肖昌春：赛诺菲中国研究负责人、赛诺菲研究院负责人 朱向阳：华奥泰生物总经理 徐亚南：武田制药全球外部创新合作部中国区负责人 邓天敬：炎明生物联合创始人/CEO 王晓冰：海军军医大学上海长征医院风湿免疫科副主任医师 卢宏韬：科望医药联合创始人/CSO、BiG总干事 张   雷：深圳湾实验室特聘研究员 靳照宇：明济生物董事长兼CEO 冯    焱：领泰生物创始人/CEO 讨论提纲： ● 如何布局自免的管线？MNC vs. Biotech各自策略 ● 比较CAR-T和TCE治疗自身免疫疾病，各有什么优缺点 ● Depleting B cells 作为自免疾病的治疗策略，能否做到治愈？ ● ADC来治疗自身免疫疾病有什么看法？ ● 自免领域，其他还有什么新的靶点和新的技术路径，值得关注？ ● 大药企的BD策略（主要关注点），biotech的BD思路（主要卖点），是哪些？ ● 如何看待newco策略，是否为一个新的退出路径？ ● 未来国内商业化路径，自免药物在国内的销售相比国际低很多，如何突破？ 10月11日Biotech私董会、科学家创业辩论赛视频快闪    02  会前私董会&科学家创业工坊 第一幕：Biotech CEO/CXO座谈会 深圳光明区生物医药产业生态介绍 谢泽鑫：光明区科创局副局长 长桌对话：Biotech的融资策略（全员讨论）联合主持： 史艺宾：大睿生物创始人/CEO、BiG青委  王奎锋：勤浩医药创始人/CEO  讨论提纲： ● 我在做什么创新药？临床/融资进展如何？ ● 商业模式：中国biotech的成长和发展路径，在目前没有清晰退出的环境下，创始人/投资人如何考虑 ● 融资渠道：政府+美元+Strategic+x... ● 政府融资渠道讨论 ● 深圳如何差异化布局生物医药，创新机会在哪里？如何长期赋能biotech成长？ ● BD/Newco交易对公司的利弊讨论 第二幕：科学家创业与转化-深圳湾实验室专场  投资人视角：科学家创业的“机遇”与“避坑指南” 冷   艳：薄荷天使基金主管合伙人 创始人视角：新形势下创收，创新与创业：感想及展望 丁元华：元启生物制药创始人/CEO 深圳湾实验室，科学家biotech项目路演 项目1-深耘联达医药有限公司（筹） 贺   耘：深圳湾实验室转化创新中心 联合主任/深耘联达创始人 项目2-五针松医药有限公司（筹） 沈卫军：深圳湾实验室转化创新中心联合主任/五针松医药创始人 项目3-砺博生物科技医药有限公司 周耀旗 ：深圳湾实验室资深研究员/砺博生物科学创始人 SMART Talk 李   超 ：深圳医学科学院 国际交流中心副主任、深圳湾实验室科研部副部长 上半场主持人： 李   圆：BiG秘书长 下半场主持人： 舒   骁：盛鼎股权投资基金管理合伙人     03   第六届BiG新药辩论赛  联合策划：BiG、湾有引力（光明生物医药创新中心） 冠名支持：倚世科技 开场致辞 赵柯禹：湾有引力CEO、深圳湾实验室转化部部长 阮红正：倚世科技CEO 特约分享：一款药卖了10亿美元！一位非典型科学家创业者的独白 黄超兰：昱言科技创始人兼董事长、北京协和医院疑难重症及罕见病全国重点实验室执行主任 * 免责声明： 本次辩论赛仅作学术交流；现场，辩手所有的观点不代表任何本人或公司立场；亦不构成任何用药及投资建议！ 科学家创业辩论赛 ● 辩题1: 教授科学家创业Biotech，参与模式的选择 正方：美国模式，教授科学家坚守科研主业，作为科学顾问参与发起biotech，仅贡献IP，公司由企业家/职业经理人团队主导经营 反方：中国特色模式，科学家深度参与/All in，作为公司实控人/大股东，公司由科学家主导经营 ● 辩题2: 教授科学家创业biotech，商业模式的选择？  正方：专注早期创新，以被MNC并购作为退出方向 反方：以搭建商业化团队，把产品推向上市，成为bio-pharma为退出方向 ● 主持 舒   骁：盛鼎股权投资基金管理合伙人 ● 辩手阵容 大湾区队 林冠宇：复健资本执行总经理（队长） 谢思维：深圳湾实验室启航学者 、湾影科技创始人&CEO  忻   蓉：时夕生物联合创始人&CEO 长三角队 娄   实：和其瑞联合创始人（队长） 黄超兰：昱言科技创始人兼董事长、北京协和医院疑难重症及罕见病全国重点实验室执行主任 谢   厅：高瓴创投董事总经理 ● 点评嘉宾： 刘毓文：薄荷天使基金创始合伙人、新生巢&播禾创始人、BiG理事 丁元华：元启生物制药创始人/CEO 王敏敏：百济神州广州创新中心CSO  ● 亲友团&踢馆队  许泽立：深圳医学科学院转化服务主管 刘   伟：深圳湾实验室转化医学中心主任助理 华   丽：瑞思普利副总经理兼董秘 ● 最佳辩手：谢厅、忻蓉 评选结果来自现场100位与会嘉宾 现场掠影  整理 | Ning 编审 | Kathy 特别致谢 联合主办：深圳医学科学院、深圳湾实验室、卫光控股 协办支持：卫光生命科学园、湾有引力（光明生物医药创新中心） 铂金支持：倚世科技 合作媒体：研发客、医药笔记、深究科学、医药速览、生物制药小编 共建Biomedical创新生态圈！ 如何加入BiG会员？

本文为转化医学网原创，转载请注明出处 作者：Jerry 导读： 结直肠癌(CRC)对免疫治疗的耐药性与FAS (Apo-1或CD95)依赖性细胞凋亡的阻碍有关，FAS是癌症的一个标志。 2023年12月26日，厦门大学研究人员在期刊《Advanced Science》上发表了题为“Pirin Inhibits FAS-Mediated Apoptosis to Support Colorectal Cancer Survival”的研究论文， 研究表明，结肠癌中pirin (PIR)蛋白的上调促进了肿瘤的发生。敲除或抑制PIR可显著增加小鼠的FAS表达、FAS依赖性细胞凋亡并减轻结直肠肿瘤的形成。结果表明PIR-NIK-NFκB2-FAS存活通路在支持结直肠癌存活中起关键作用。 https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/advs.202301476 研究背景 01 PIR (Pirin)是cupin超家族蛋白的一员，最初在酵母双杂交筛选中被鉴定为核因子I/CCAAT盒转录因子(NFI/CTF1)的相互作用因子。它在人体几乎所有组织中普遍表达，主要分布在细胞核和细胞质中。近年来，越来越多的证据表明PIR与几种癌症有关，包括结肠癌、乳腺癌和黑色素瘤，它可能是癌症生长和恶性肿瘤的刺激物。此外，PIR已被确定为NRF2的靶标，并在人类结直肠癌中过表达，功能未知。结直肠癌是一种起源于结肠或直肠的恶性肿瘤。在本研究中，研究人员旨在确定PIR在CRC中促进肿瘤发生的确切生物学功能和相应的机制。为了解决这些问题，研究人员在HCT116细胞中敲除(KD) PIR，观察到严重的细胞凋亡和显著的FAS上调，表明PIR可能是FAS表达的抑制因子。 NFκB家族由转录因子RELA (p65)、RELB、c-REL、NFκB1 (p105/p50)和NFκB2 (p100/p52)组成，属于典型和非典型NFκB通路。典型的nf - κ b1通路的激活依赖于i - κ b α的蛋白酶体降解，导致由p50和p65/c-REL组成的蛋白复合物的激活。相反，非规范或替代nf - κ b2途径的激活在很大程度上依赖于p100前体的选择性蛋白酶体降解，以产生与RELB形成异源二聚体的蛋白片段p52。然后，p52/RELB复合体作为功能性转录因子。nf - κ b诱导激酶(NIK)在p100的加工和激活中起关键作用。据报道，尽管NFκB2的主要功能是调节免疫应答，但在某些死亡诱导信号刺激下，它作为促凋亡蛋白发挥作用。 研究进展 02 本研究中，研究人员报告了PIR蛋白在保护癌细胞免受CD8+杀手T细胞凋亡中的作用，其机制包括破坏FAS转录活性和阻断FAS膜易位。我们研究的重点是内源性FAS蛋白的表达及其在细胞膜上的易位在CD8+ T淋巴细胞介导的细胞凋亡中的重要性。在FAS表达调控方面，研究人员发现成熟的nf - κ b2复合物(p52-RELB)而非nf - κ b1复合物(p50-RELA)在结直肠癌中通过直接结合其启动子区域并激活其转录来调控FAS表达。研究人员进一步发现PIR是NFκB2介导的FAS转录活性的强抑制因子。PIR通过两种方式抑制NFκB2。通过这些方式，PIR显著抑制FAS表达。此外，PIR与FAS相互作用并将其保留在细胞质中，阻止其膜易位。 综上所述，研究人员建立了PIR-NIK-NFκB2-FAS生存信号转导通路，提示PIR是一个重要的生存因子，通过多种机制抑制基于FAS的细胞凋亡，促进结直肠癌恶性发展。 在这项研究中，研究人员也提供了令人信服的证据，证明PIR可能是一个新的治疗结直肠癌的靶点。 首先，即使没有上游启动子如FAS配体或FAS单抗的刺激，PIR KD或PIR抑制剂引起的内源性FAS上调也能显著触发细胞凋亡。这一观察在结肠特异性PIR敲除小鼠中得到了证实，这些小鼠表现出高水平的FAS表达，并显著延缓了AOM/ dss诱导的结肠癌形成。其次，野生型HCT116细胞或高表达PIR的HT29细胞对FAS mAb或CD8+ T细胞诱导的细胞死亡具有抗性，相反，适度下调PIR即使不足以启动细胞凋亡，也可以显著增强HCT116结直肠癌细胞对FAS mAb或CD8+ T细胞诱导的细胞死亡的敏感性。第三，PIR抑制剂可显著抑制HCT116细胞移植瘤的生长。综上所述，抑制PIR可能是治疗高水平PIR和低水平FAS的CRC的一种有前景的策略。 抑制PIR可减轻结肠癌的形成 研究结论 03 根据研究人员的发现，PIR抑制剂可以通过刺激肿瘤内源性FAS表达及其膜易位来增强CD8+杀伤T细胞的抗肿瘤活性，PIR抑制剂与免疫检查点阻断联合可能是治疗结直肠癌的潜在策略，特别是那些免疫治疗耐药的结直肠癌。因此，未来迫切需要开发更有效的PIR抑制剂。 参考资料： https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/advs.202301476 注：本文旨在介绍医学研究进展，不能作为治疗方案参考。如需获得健康指导，请至正规医院就诊。 热门·直播/活动 🕓 北京｜12月19日-20日 ▶第四届单细胞测序技术应用研讨会暨单细胞&空间组学研讨会（日程稍后公布） 点击对应文字 查看详情